Агар Cetrimide в чашке HiMedia MP024-50PT (50 чашек)

Готовая селективная питательная среда Агар Cetrimide в чашке HiMedia MP024-50PT (50 чашек) предназначена для выделения Pseudomonas aeruginosa и поставляется в чашках диаметром 90 мм с 25 мл среды. Среда применяется для исследования клинических проб и воды; высокая селективность может подавлять рост отдельных штаммов целевого микроорганизма.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из клинических проб и образцов воды. Также применяется при исследовании косметических средств и оценке эффективности дезинфицирующих средств в отношении этого микроорганизма.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных характеристик среды.

Принцип действия

Pseudomonas aeruginosa хорошо растёт на обычных лабораторных средах. Для её выделения из объектов окружающей среды, а также из проб человека, животных и растений используют среды с селективным агентом и компонентами, способствующими образованию пигментов. Многие селективные среды основаны на природной устойчивости микроорганизмов определённых видов к антибактериальным веществам.

Цетримид подавляет рост многих микроорганизмов, одновременно обеспечивая развитие типичных колоний Pseudomonas aeruginosa. Цетримид — четвертичная аммониевая соль, действующая как катионное поверхностно-активное вещество: в месте контакта она снижает поверхностное натяжение и оказывает осаждающее, комплексообразующее и денатурирующее действие на белки бактериальной мембраны. Цетримид подавляет широкий спектр микроорганизмов, включая виды Pseudomonas, отличные от Pseudomonas aeruginosa.

Среда Cetrimide Agar представляет собой модификацию Tech Agar (среды A), разработанной King и соавторами для усиления продукции пиоцианина бактериями рода Pseudomonas. В среду добавили 0,1 % цетримид для селективного выделения P. aeruginosa. Позднее, с появлением высокоочищенного цетримидa, его концентрацию в среде снизили.

Желатиновый пептон обеспечивает P. aeruginosa необходимыми питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Хлорид магния и сульфат калия стимулируют образование пиоцианина.

Методика проведения анализа

1. Для выделения P. aeruginosa рекомендуется предварительно засеять пробу в неселективную среду, например в бульон BHI (M210) или триптический соево-казеиновый бульон (M011).
2. При высокой концентрации микроорганизмов исследуемую пробу можно непосредственно внести на агар Cetrimide.
3. Асептически нанесите посевной материал на поверхность чашки штриховым методом, инокуляцией или поверхностным распределением. Рекомендуемая посевная доза — 50–100 КОЕ.
4. Инкубируйте при 37 °C в течение 18–24 ч.
5. Оцените рост и характер колоний. Колонии P. aeruginosa могут быть пигментированными — синими или сине-зелёными — либо непигментированными. Предположительно положительными считают колонии с сине-зелёной пигментацией и флуоресценцией при 250 нм.
6. Для подтверждения результатов выполните биохимические и серологические исследования.

P. aeruginosa может образовывать пиоцианин — водорастворимый синий нефлуоресцирующий феназиновый пигмент. Дополнительные признаки — характерная морфология колоний и запах аминоацетофенона, напоминающий запах винограда. P. aeruginosa — единственный известный вид рода Pseudomonas и единственная известная грамотрицательная палочка, выделяющая пиоцианин.

При кратковременном нахождении посевов при комнатной температуре P. aeruginosa может утратить флуоресценцию в ультрафиолетовом свете. Флуоресценция восстанавливается после повторной инкубации чашек. На образование пигмента также может влиять тип пептона, использованного в основе среды. Некоторые штаммы P. aeruginosa не образуют пиоцианин. Другие виды Pseudomonas не образуют пиоцианин, но могут флуоресцировать в ультрафиолетовом свете.

Типы проб и обращение с ними

Типы проб: клинические образцы, включая мочу, материал из ран и гной; образцы воды.

При работе с клиническими образцами соблюдайте установленные правила обращения с пробами. При отборе и обработке проб воды следуйте применимым руководствам и местным нормативным требованиям.

Ограничения и интерпретация результатов

• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать на среде неодинаковые характеристики роста.
• Каждую серию среды проверяют на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Для применения с другими микроорганизмами пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных задач.
• Среда обладает высокой селективностью и может подавлять рост отдельных штаммов; цетримид высокотоксичен для ряда микроорганизмов.
• Некоторые виды рода Pseudomonas также могут подавляться средой.
• Некоторые неферментирующие микроорганизмы и аэробные спорообразующие бактерии могут образовывать водорастворимую коричневато-жёлтую или коричневую пигментацию. Бактерии рода Serratia могут образовывать розовую пигментацию.
• Для подтверждения результатов необходимо проводить биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид: стерильный агар Cetrimide в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: светло-янтарный.

Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.

pH: 7,00–7,40.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Ростовые характеристики оценивают после инкубации при указанной температуре в течение установленного периода. Показатель восстановления для роста бактерий на соево-казеиновом агаре принимают за 100 %.