Питательная микробиологическая агаровая среда HiMedia MM331-500G Висмут-сульфитный агар Вильсона и Блэра (среда 10) — сухой порошок массой 500 г для приготовления селективной среды. Среда предназначена для селективного выделения и пересева видов Salmonella, включая Salmonella Typhi, и подавляет рост ряда колониформных бактерий.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для селективного пересева видов Salmonella в соответствии с Индийской фармакопеей 2014 года. Агар Вильсона и Блэра применяют преимущественно для выделения Salmonella из клинических образцов, особенно Salmonella Typhi, а также для выделения лактозоферментирующих штаммов Salmonella, которые нельзя дифференцировать на дифференциальных средах, содержащих лактозу.

Среду рекомендуют использовать после обогащения в бульоне Раппапорта—Вассилиадиса для обогащения Salmonella. Среда особенно пригодна для выделения Salmonella Typhi.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Эквивалент мясного экстракта.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 4,5 г части A в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Суспендируйте 5,6 г части B — висмут-сульфитно-глюкозо-фосфатной смеси, раствора (i) — в 20 мл стерильной очищенной или дистиллированной воды.
5. Кипятите раствор до полного растворения всех компонентов.
6. Суспендируйте 0,045 г части C — цитратно-железоаммонийно-бриллиантово-зелёной смеси, раствора (ii) — в 4,5 мл стерильной очищенной или дистиллированной воды.
7. В асептических условиях смешайте 20 мл части B и 4,5 мл части C со 100 мл предварительно расплавленного стерильного питательного агара, приготовленного из части A.
8. Охладите смесь до 60 °C и разлейте в стерильные чашки Петри.

Указанная методика соответствует действующему изданию фармакопеи. Установленный срок годности относится к этому изданию; перед применением необходимо убедиться в совместимости методики с последним действующим изданием фармакопеи.

Принцип действия и интерпретация

Salmonella — род грамотрицательных представителей семейства Enterobacteriaceae, часто вызывающих пищевые инфекции и являющихся возбудителями брюшного тифа и паратифов. Виды Salmonella выделяют от человека и животных. Известно более 2000 сероваров Salmonella, каждый из которых характеризуется собственной специфичностью к хозяину.

Человек является единственным известным природным резервуаром для серовара Salmonella Typhi и сероваров Salmonella Paratyphi A, Salmonella Paratyphi B и Salmonella Paratyphi C. Передача микроорганизма возможна фекально-оральным путём; выделение происходит с фекалиями человека, а распространение — через загрязнённую воду, пищу или при контакте между людьми при недостаточном соблюдении правил личной гигиены.

Агар Вильсона и Блэра, сформулированный Wilson и Blair, предназначен для выделения видов Salmonella, особенно Salmonella Typhi, из клинических образцов. Состав селективного реагента представляет собой модификацию бисмут-сульфитного реагента, описанного Hajna и Perry.

Среда обладает селективностью в отношении Salmonella и подавляет рост колиморфных бактерий и Proteus. Отдельные штаммы колиморфных бактерий могут формировать тускло-зелёные или коричневые колонии, но без окружающего металлического блеска.

Лактоза не используется в этой среде как сбраживаемый субстрат, поэтому среда пригодна для выделения лактозоферментирующих штаммов Salmonella, которые не могут быть дифференцированы на дифференциальных средах с лактозой.

Функции компонентов:

• пептон и мясной экстракт B обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими питательными веществами;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• бриллиантовый зелёный подавляет рост всех грамположительных бактерий;
• глюкоза является сбраживаемым углеводом;
• висмут — тяжёлый металл, подавляющий большинство грамотрицательных кишечных палочек, за исключением Salmonella;
• цитрат железа(III) восстанавливается видами Salmonella в присутствии цитрата висмута-аммония и глюкозы с образованием сульфида железа, что проявляется чёрной окраской колоний;
• гидрофосфат натрия обеспечивает буферные свойства среды.

Контроль качества

Внешний вид компонентов

• Часть A: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок белого или почти белого цвета.
• Часть C: однородные сыпучие гранулы зелёного цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

После добавления частей B и C к части A в чашках Петри образуется