Дезоксихолат-цитратный агар HiMedia MM065 (индийский фармакопейный)

HiMedia·Арт.: 0042373·Арт. произв.: MM065

Дезоксихолат-цитратный агар HiMedia MM065 (индийский фармакопейный)

Name: Дезоксихолат-цитратный агар HiMedia MM065 (индийский фармакопейный)
Brand: HiMedia
SKU: 0042373
Availability: PreOrder

Под заказпо запросу

Селективная питательная среда Дезоксихолат-цитратный агар HiMedia MM065 (индийский фармакопейный) для выделения и идентификации бактерий рода Salmonella. Применяется при санитарно-бактериологическом контроле пищевых продуктов и фармацевтических препаратов, при этом для выделения Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую среду.

Описание

Назначение и область применения

Дезоксихолат-цитратный агар HiMedia MM065 предназначен для селективного выделения и идентификации кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов. Среда рекомендована Индийской фармакопеей 2007 года и применяется для рутинного контроля наличия Salmonella в пищевых и фармацевтических образцах.

Среда также используется в санитарной микробиологии пищевых продуктов. Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется применять совместно с другими питательными средами, включая агар МакКонки MM082 и висмут-сульфитный агар MM027.

Для выделения Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую питательную среду.

Состав

Состав на 1 л:

Компонент	г/л
Пептон	10,000
Мясной экстракт	10,000
Моногидрат лактозы	10,000
Трёхнатриевый цитрат	20,000
Цитрат железа	1,000
Дезоксихолат натрия	5,000
Нейтральный красный	0,020
Агар	13,500
pH после нагревания при 25 °C	7,3 ± 0,2

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Приготовление среды

Внесите 69,02 г сухой обезвоженной среды, что соответствует массе среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
Перемешивайте во время нагревания, чтобы предотвратить пригорание.
Не автоклавируйте, не перегревайте и не расплавляйте среду повторно.
Охладите среду до 45–50 °C.
Разлейте среду в чашки Петри.
Перед использованием подсушите поверхность агара.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат-цитратный агар приготовлен по модифицированной прописи Лейфсона и рекомендован Индийской фармакопеей 2007 года. Исходная пропись Лейфсона предусматривает дифференциальную агаризованную среду с цитратами и дезоксихолатом в качестве ингибиторов роста; в настоящей формуле концентрации ингибирующих компонентов повышены.

Дезоксихолат натрия и цитраты подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Более высокая концентрация цитратных и дезоксихолатных солей ингибирует Proteus и другие грамположительные микроорганизмы. При pH 7,3–7,5 дезоксихолат натрия оказывает ингибирующее действие на грамположительные бактерии. Цитратные соли в концентрации, предусмотренной формулой, подавляют грамположительные бактерии и большинство других нормальных кишечных микроорганизмов.

Сочетание мясного экстракта и пептона обеспечивает среду азотом, минеральными веществами и витаминными факторами, необходимыми для усиленного роста. Моногидрат лактозы служит источником сбраживаемого углевода. Нейтральный красный используется как индикатор:

лактозосбраживающие бактерии, включая колиформные бактерии, образуют розовые колонии;
лактозонесбраживающие бактерии образуют бесцветные колонии;
Salmonella образует бесцветные непрозрачные колонии с чёрным центром или без него;
Shigella образует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие продукции H₂S;
кислота, образующаяся лактозосбраживающими бактериями, может вызывать осаждение дезоксихолата и появление зоны осадка вокруг колонии.

Тиосульфат натрия способствует реактивации серосодержащих соединений и предотвращает их высыхание при хранении. Тиосульфат натрия служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, который расщепляет его с образованием H₂S. Сероводород реагирует с ионами железа в среде, в результате чего образуется чёрный осадок сульфида железа FeS. Поэтому колонии могут иметь характерный чёрный центр.

Тиосульфаты также инактивируют галогены и могут снижать их токсичность в исследуемой пробе, если галогены присутствуют при проведении испытаний микробиологических пределов.

Среда обеспечивает необходимые факторы роста для нескольких ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды позволяет использовать достаточно высокую посевную нагрузку без риска подавления роста Shigella и Salmonella другой сопутствующей микрофлорой.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.

Реакция среды

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 6,90 % масс./об. после нагревания.

pH: 7,10–7,50.

Номинальное значение pH после нагревания при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с требованиями Индийской фармакопеи. Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Коэффициент восстановления рассчитывают относительно роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина, для которого показатель восстановления принимают за 100 %.

Испытание на указанные микроорганизмы

Микроорганизм	Посевная доза (КОЕ)	Наблюдаемое значение для серии (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации	Продолжительность инкубации
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветная и непрозрачная, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Salmonella Abony NCTC 6017	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветная и непрозрачная, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч

Дополнительные микробиологические испытания

Микроорганизм	Посевная доза (КОЕ)	Наблюдаемое значение для серии (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации	Продолжительность инкубации
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветная и непрозрачная, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветная и непрозрачная, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Escherichia coli NCTC 9002	50–100	0–10	0–10 %	Розовая, с осадком желчи	36–38 °C	18–24 ч
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	0–10	0–10 %	Розовая, с осадком желчи	36–38 °C	18–24 ч
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	0–10	0–10 %	Бесцветная	36–38 °C	18–24 ч
Enterococcus faecalis ATCC 29212	≥10³	0	0 %		36–38 °C	18–24 ч

Технические характеристики

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	Стандартный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	HDPE
Назначение изделия	Агар
Производитель	HiMedia

Условия хранения и срок годности

Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C.
Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.