HiMedia MM065-5KG Дезоксихолат-цитратный агар

Селективная обезвоженная питательная среда HiMedia MM065-5KG Дезоксихолат-цитратный агар в упаковке 5 кг предназначена для микробиологического анализа при температуре 10–30 °C. Среда используется для выделения кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтической продукции; при выделении Shigella рекомендуется применять менее ингибирующую среду.

Назначение и область применения

Дезоксихолат-цитратный агар применяют для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтической продукции. Среда также используется для рутинного контроля наличия Salmonella в пищевых продуктах и фармацевтической продукции.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется использовать эту среду совместно с другими средами, например агаром МакКонки (MM082) и висмут-сульфитным агаром (MM027).

При необходимости выделения Shigella рекомендуется применять менее ингибирующую среду.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 69,02 г сухой обезвоженной среды, что соответствует количеству среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды. Перемешивайте, чтобы предотвратить пригорание.
3. Не автоклавируйте, не перегревайте и не расплавляйте среду повторно.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду по чашкам Петри.
6. Перед использованием высушите поверхность агара.

Принцип действия и интерпретация

Дезоксихолат-цитратный агар приготовлен по модифицированной формуле Лейфсона и рекомендован Индийской фармакопеей 2007 года. Среда применяется для выделения кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтической продукции.

Salmonella является основным возбудителем кишечных заболеваний, особенно пищевых токсикоинфекций и брюшного тифа; впервые бактерия была описана Эбертом в 1880 году.

Протеус и другие грамположительные организмы подавляются из-за повышенной концентрации цитратных и дезоксихолатных солей. Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 ингибирует грамположительные бактерии. Цитратная соль в концентрации, предусмотренной формулой, подавляет грамположительные бактерии и большинство других нормальных кишечных микроорганизмов.

Тиосульфат натрия способствует реактивации серосодержащих соединений и предотвращает их высушивание при хранении. Он также является субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, который расщепляет его с образованием H₂S. Сероводород реагирует с ионами железа в среде с образованием чёрного осадка FeS, что придаёт колониям характерный вид с чёрным центром.

Тиосульфаты натрия также инактивируют галогены и могут снижать их токсичность в исследуемой пробе, если галогены присутствуют во время испытаний на микробиологические пределы.

Сочетание мясного экстракта и пептона обеспечивает азот, минеральные вещества и витаминные факторы, необходимые для усиленного роста. Лактозы моногидрат служит источником ферментируемых углеводов.

Нейтральный красный используется как индикатор. В его присутствии лактозоферментирующие микроорганизмы, например колиформные бактерии, образуют розовые колонии, а неферментирующие лактозу микроорганизмы — бесцветные колонии.

Salmonella образует бесцветные непрозрачные колонии с чёрным центром или без него. Shigella образует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие продукции H₂S. Кислота, образующаяся при ферментации лактозы, может вызывать осаждение дезоксихолата и появление зоны осадка вокруг колонии.

Среда обеспечивает необходимые факторы роста для нескольких ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды позволяет использовать достаточно плотный посев без риска чрезмерного зарастания Shigella и Salmonella другими представителями микрофлоры.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Свойства приготовленной среды

• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 6,90 % масс./об. после нагревания.
• pH: 7,10–7,50.
• pH после нагревания: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с Индийской фармакопеей (IP). Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновой агаровой среде.

Испытание на указанные микроорганизмы

Дополнительные микробиологические испытания