HiMedia MM065-500G Дезоксихолат-цитратный агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MM065-500G Дезоксихолат-цитратный агар представляет собой сухой порошок массой 500 г. Среда предназначена для выделения кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов, при этом для выделения шигелл рекомендуется менее ингибирующая среда.

Назначение и область применения

Дезоксихолат-цитратный агар применяют для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов. Среду регулярно используют для выявления Salmonella в пищевых продуктах и фармацевтических препаратах.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется использовать дезоксихолат-цитратный агар совместно с другими средами:

• агар МакКонки (MM082);
• висмут-сульфитный агар (MM027).

Среда обеспечивает факторы роста, необходимые для культивирования нескольких ауксотрофных штаммов Salmonella Paratyphi и Salmonella Typhi. Селективность среды допускает внесение достаточно больших посевных доз без риска чрезмерного роста другой микрофлоры, подавляя её разрастание поверх колоний Shigella и Salmonella.

Для выделения шигелл рекомендуется применять менее ингибирующую питательную среду.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат-цитратный агар приготовлен по модифицированной формуле Лейфсона и рекомендован Индийской фармакопеей 2007 года (IP). Среда предназначена для выделения кишечных патогенов, относящихся к группам Salmonella и Shigella.

Высокие концентрации цитратных и дезоксихолатных солей ингибируют Proteus и другие грамположительные микроорганизмы. Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 оказывает ингибирующее действие на грамположительные бактерии. Цитратная соль в концентрации, предусмотренной рецептурой, ингибирует грамположительные бактерии и большинство других нормальных кишечных микроорганизмов.

Сочетание мясного экстракта и пептона обеспечивает азот, минеральные вещества и витаминные факторы, необходимые для усиленного роста. Лактозы моногидрат служит источником сбраживаемых углеводов. Нейтральный красный используется как индикатор:

• лактозосбраживающие микроорганизмы, включая колиформные бактерии, образуют розовые колонии;
• лактозонесбраживающие микроорганизмы образуют бесцветные колонии;
• Salmonella образует бесцветные непрозрачные колонии с чёрным центром или без него;
• Shigella образует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие образования H₂S.

Кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, может вызывать осаждение дезоксихолата и образование зоны осадка вокруг колонии.

Натрия тиосульфат способствует реактивации серосодержащих соединений и предотвращает их высыхание при хранении. Тиосульфат служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, который расщепляет его с образованием H₂S. Сероводород вступает в реакцию с ионами Fe²⁺ в среде с образованием чёрного осадка FeS, поэтому колонии могут иметь характерный чёрный центр.

Тиосульфаты натрия также инактивируют галогены и могут снижать их токсичность в исследуемой пробе, если галогены присутствуют при проведении микробиологических испытаний на микробиологические пределы.

Salmonella является основным возбудителем кишечных заболеваний, особенно пищевых токсикоинфекций и брюшного тифа; впервые этот микроорганизм наблюдал Эберт в 1880 году.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 69,02 г сухой обезвоженной среды, что соответствует массе среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Перемешивайте среду во время нагревания, чтобы предотвратить обугливание.
4. Не автоклавируйте среду, не перегревайте и не подвергайте повторному расплавлению.
5. Охладите раствор до 45–50 °C.
6. Разлейте среду по чашкам.
7. Перед использованием высушите поверхность агара.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,35 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция: реакция 6,90 % масс./об. водного раствора после нагревания.

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Ростовые характеристики определяют в соответствии с Индийской фармакопеей (IP). Культуральную реакцию наблюдают после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Испытание на указанные микроорганизмы