HiMedia MM065-2.5KG Дезоксихолат-цитратный агар

HiMedia·Арт.: 0050736·Арт. произв.: MM065-2.5KG

HiMedia MM065-2.5KG Дезоксихолат-цитратный агар

Name: HiMedia MM065-2.5KG Дезоксихолат-цитратный агар
Brand: HiMedia
SKU: 0050736
Price: 50734 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ50 734 руб.

Питательная агаризованная среда HiMedia MM065-2.5KG Дезоксихолат-цитратный агар производства HiMedia — порошковая среда массой 2,5 кг для селективного выделения кишечных патогенов. Дезоксихолат-цитратный агар применяют при микробиологическом контроле пищевых и фармацевтических продуктов, однако для выделения шигелл рекомендуется использовать менее ингибирующую среду.

Описание

Назначение и область применения

Дезоксихолат-цитратный агар используют для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов, относящихся к группам Salmonella и Shigella, из пищевых и фармацевтических продуктов. Среда также применяется для рутинного контроля наличия Salmonella в пищевых и фармацевтических продуктах.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется использовать совместно с другими средами, включая агар МакКонки MM082 и висмут-сульфитный агар MM027.

При необходимости выделения Shigella рекомендуется применять менее ингибирующую питательную среду.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим параметрам.

Компонент	г/л
Пептон	10,000
Мясной экстракт	10,000
Лактозы моногидрат	10,000
Тринатрий цитрат	20,000
Цитрат железа	1,000
Дезоксихолат натрия	5,000
Нейтральный красный	0,020
Агар	13,500
pH после нагревания при 25 °C	7,3 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат-цитратный агар приготовлен по модифицированной формуле Лейфсона и рекомендован Индийской фармакопеей 2007 года как рецептура питательной среды.

Повышенная концентрация цитратных и дезоксихолатных солей подавляет рост протеев и других грамположительных микроорганизмов. Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 оказывает ингибирующее действие на грамположительные бактерии. Цитратная соль в концентрации, предусмотренной рецептурой, ингибирует грамположительные бактерии и большинство других нормальных кишечных микроорганизмов.

Мясной экстракт и пептон поставляют азот, минеральные вещества и витаминные факторы, необходимые для усиленного роста микроорганизмов. Лактозы моногидрат служит источником ферментируемых углеводов.

Нейтральный красный используется как индикатор. Лактозоферментирующие микроорганизмы, включая колиформные бактерии, образуют розовые колонии, а лактозонеферментирующие микроорганизмы — бесцветные колонии.

Salmonella образует бесцветные непрозрачные колонии с чёрным центром или без него. Shigella формирует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие продукции H₂S.

Кислота, образующаяся при ферментации лактозы, может вызывать осаждение дезоксихолата и появление зоны осадка вокруг колонии.

Среда обеспечивает необходимые факторы роста для нескольких ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды позволяет использовать достаточно большие посевные дозы без риска перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

В описании принципа действия указано, что тиосульфат натрия способствует реактивации серосодержащих соединений и предотвращает их высыхание при хранении. Тиосульфат натрия также служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, который расщепляет его с образованием H₂S. H₂S реагирует с ионами Fe в среде с образованием чёрного осадка FeS, придающего колониям характерный чёрный центр. Тиосульфаты инактивируют галогены и могут снижать их токсичность в исследуемой пробе, в том числе при испытаниях на микробиологические пределы.

Методика приготовления среды

Суспендируйте 69,02 г сухой обезвоженной среды, что соответствует эквивалентной массе среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
Перемешивайте во время нагревания, чтобы предотвратить пригорание.
Не подвергайте автоклавированию, перегреву и повторному расплавлению.
Охладите среду до 45–50 °C.
Разлейте среду по чашкам Петри.
Перед использованием высушите поверхность агара.

Технические характеристики

Полное название: HiMedia MM065-2.5KG Дезоксихолат-цитратный агар
Производитель: HiMedia
Назначение изделия: агар
Физическая форма: порошок
Масса: 2,5 кг
Тип продукта: стандартный
Тип упаковки: HDPE
Происхождение сырья: животное
Указанный диапазон температуры: 10–30 °C

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.
Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.
Реакция: реакция 6,90%-ного водного раствора после нагревания.
pH: 7,10–7,50.
pH после нагревания при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Ростовые характеристики определяют в соответствии с Индийской фармакопеей. Культуральную реакцию наблюдали после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Испытание на указанные микроорганизмы

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Наблюдаемое значение для партии (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации	Продолжительность инкубации
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Salmonella Abony NCTC 6017	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч

Дополнительные микробиологические испытания

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Наблюдаемое значение для партии (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации	Продолжительность инкубации
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Escherichia coli NCTC 9002	50–100	0–10	0–10 %	Розовые, с осадком желчи	36–38 °C	18–24 ч
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	0–10	0–10 %	Розовые, с осадком желчи	36–38 °C	18–24 ч
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	0–10	0–10 %	Бесцветные	36–38 °C	18–24 ч
Enterococcus faecalis ATCC 29212	≥10³	0	0 %		36–38 °C	18–24 ч

Условия хранения и срок годности

Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой таре.
Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Сравнительный контекст

В отличие от менее ингибирующих сред, дезоксихолат-цитратный агар допускает применение достаточно больших посевных доз благодаря подавлению роста протеев, грамположительных бактерий и большинства нормальных кишечных микроорганизмов; для выделения Shigella производитель рекомендует менее ингибирующую среду.