HiMedia MM065-100G Дезоксихолат-цитратный агар

HiMedia·Арт.: 0050735·Арт. произв.: MM065-100G

HiMedia MM065-100G Дезоксихолат-цитратный агар

Name: HiMedia MM065-100G Дезоксихолат-цитратный агар
Brand: HiMedia
SKU: 0050735
Price: 4049 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ4 049 руб.

Микробиологическая питательная среда HiMedia MM065-100G Дезоксихолат-цитратный агар — сухой порошок для приготовления селективного агара с дозировкой 69,02 г/л. Применяется для выделения и восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтической продукции; при выделении шигелл рекомендуется использовать менее ингибирующую среду.

Описание

Назначение и область применения

Дезоксихолат-цитратный агар предназначен для выделения кишечных патогенов, относящихся к группам Salmonella и Shigella, из пищевых продуктов и фармацевтической продукции. Среда регулярно используется для выявления Salmonella в пищевых продуктах и фармацевтической продукции.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется применять среду совместно с другими питательными средами, включая агар МакКонки (MM082) и бисмут-сульфитный агар (MM027).

При выделении шигелл рекомендуется использовать менее ингибирующую питательную среду.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Компонент	г/л
Пептон	10,000
Мясной экстракт	10,000
Лактозы моногидрат	10,000
Тринатрий цитрат	20,000
Цитрат железа	1,000
Дезоксихолат натрия	5,000
Нейтральный красный	0,020
Агар	13,500
pH после нагревания при 25 °C	7,3 ± 0,2

Приготовление питательной среды

Взвесьте 69,02 г сухой обезвоженной среды — эквивалентное количество на 1 л готовой среды.
Суспендируйте порошок в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
Перемешивайте во время нагревания, чтобы предотвратить пригорание.
Не автоклавируйте, не перегревайте и не расплавляйте среду повторно.
Охладите среду до 45–50 °C.
Разлейте среду по чашкам Петри.
Перед использованием высушите поверхность агара.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат-цитратный агар приготовлен по модифицированной формуле Лейфсона и рекомендован Индийской фармакопеей 2007 года. Среда предназначена для выделения кишечных патогенов из пищевых продуктов и фармацевтической продукции.

Повышенная концентрация цитратных и дезоксихолатных солей подавляет рост Proteus и других грамположительных микроорганизмов. Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 ингибирует грамположительные бактерии. Цитратная соль в концентрации, предусмотренной рецептурой, подавляет грамположительные бактерии и большинство других представителей нормальной кишечной микрофлоры.

В описании принципа действия также указано, что тиосульфат натрия способствует реактивации серосодержащих соединений и предотвращает их высыхание при хранении. Тиосульфат натрия служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, который расщепляет его с образованием сероводорода H₂S. Сероводород реагирует с ионами Fe²⁺ в среде с образованием чёрного осадка FeS, поэтому колонии могут иметь чёрный центр. Тиосульфаты также инактивируют галогены и могут снижать их токсичность в исследуемой пробе, если галогены присутствуют при проведении испытаний на микробиологические пределы.

Мясной экстракт и пептон обеспечивают среду азотом, минеральными веществами и витаминными факторами, необходимыми для усиленного роста. Лактозы моногидрат служит источником сбраживаемого углевода.

Нейтральный красный используется как индикатор. Лактозосбраживающие микроорганизмы, включая колиформные бактерии, образуют розовые колонии, а лактозонесбраживающие микроорганизмы — бесцветные колонии. Salmonella образует бесцветные непрозрачные колонии с чёрным центром или без него. Shigella образует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие продукции H₂S.

Кислота, образующаяся лактозосбраживающими микроорганизмами, может вызывать осаждение дезоксихолата и появление зоны осаждения вокруг колонии.

Среда обеспечивает факторы роста, необходимые для ряда ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды допускает использование достаточно больших посевных доз без риска чрезмерного зарастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.
Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, приготовленным из 1,35 % агара.
Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.
Реакция: реакция водного раствора концентрацией 6,90 % (м/об) после нагревания.
pH: 7,10–7,50.
pH после нагревания при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Ростовые характеристики оценивали после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Испытание стимуляции роста проводят в соответствии с Индийской фармакопеей. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Испытание на указанные микроорганизмы

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Наблюдаемое значение для серии (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации	Продолжительность инкубации
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Salmonella Abony NCTC 6017	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч

Дополнительные микробиологические испытания

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Наблюдаемое значение для серии (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации	Продолжительность инкубации
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	25–100	≥50 %	Бесцветные и непрозрачные, с чёрным центром или без него	36–38 °C	18–24 ч
Escherichia coli NCTC 9002	50–100	0–10	0–10 %	Розовые, с осадком желчи	36–38 °C	18–24 ч
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	0–10	0–10 %	Розовые, с осадком желчи	36–38 °C	18–24 ч
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	0–10	0–10 %	Бесцветные	36–38 °C	18–24 ч
Enterococcus faecalis ATCC 29212	≥103	0	0 %		36–38 °C	18–24 ч