HiMedia MM027-500G Висмут-сульфитный агар (Twin Pack)

HiMedia·Арт.: 0050727·Арт. произв.: MM027-500G

HiMedia MM027-500G Висмут-сульфитный агар (Twin Pack)

Name: HiMedia MM027-500G Висмут-сульфитный агар (Twin Pack)
Brand: HiMedia
SKU: 0050727
Price: 12460 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ12 460 руб.

Питательная микробиологическая среда HiMedia MM027-500G Висмут-сульфитный агар (Twin Pack) — порошковая среда массой 500 г для селективного культивирования. Среда предназначена для селективного выделения и идентификации сальмонелл, при этом может ингибировать некоторые штаммы рода Salmonella и не должна использоваться как единственная селективная среда.

Описание

Назначение

Висмут-сульфитный агар предназначен для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других представителей рода Salmonella из патологического материала, сточных вод, воды, пищевых продуктов и другой продукции. Состав среды соответствует требованиям Индийской фармакопеи 1996 года (IP).

Среда представляет собой модификацию среды Уилсона и Блэра и допускает использование увеличенной посевной дозы, а также сильно контаминированных образцов по сравнению с другими селективными средами.

Состав

Состав приведён для приготовления среды.

Компонент	г/л
Часть A (раствор 1)
Мясной экстракт	6,000
Пептон	10,000
Бриллиантовый зелёный	0,010
Цитрат железа	0,400
Агар	24,000
Часть B (раствор 2)
Цитрат висмута-аммония	3,000
Сульфит натрия	10,000
Безводный гидрофосфат натрия	5,000
Декстрозы моногидрат	5,000

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Методика приготовления

Суспендируйте 40,4 г части A (раствора 1) в 1000 мл дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
Стерилизуйте при температуре 115 °C в течение 30 мин.
Суспендируйте 22,54 г части B — эквивалентную массу обезвоженной среды на литр — в 100 мл дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения.
Не автоклавируйте часть B.
Добавьте один объём раствора части B к десяти объёмам предварительно расплавленного и охлаждённого до 55 °C раствора части A (в исходной методике обозначен как раствор Part I).
Перед разливом в стерильные чашки Петри равномерно диспергируйте образовавшийся осадок сульфита висмута в готовом геле.

Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения осаждённого сульфита висмута в конечном геле.

Перед использованием приготовленную среду следует хранить при 2–8 °C в течение 5 суток.

Принцип действия и интерпретация

Бриллиантовый зелёный и сульфит висмута, входящие в состав среды, подавляют рост кишечных грамотрицательных и грамположительных бактерий. Пептон и мясной экстракт служат источниками необходимых для роста микроорганизмов питательных веществ.

Ферментируемым источником углеводов является декстроза, обеспечивающая энергией усиленный рост микроорганизмов. Фосфаты выполняют функцию буферного компонента. Ионы висмута восстанавливаются до металлического висмута, который придаёт колониям окружающий металлический блеск. Сульфит восстанавливается до чёрного сульфида железа с выделением H₂S, что вызывает чёрное окрашивание.

Типичный вид колоний:

Salmonella Enteritidis и Salmonella Typhimurium — чёрные колонии, напоминающие «заячьи глаза», с окружающим металлическим блеском;
Salmonella Paratyphi A — светло-зелёные колонии;
отдельные штаммы Proteus — тускло-зелёные или коричневые колонии с металлическим блеском.

Ограничения применения:

среда может ингибировать некоторые штаммы видов Salmonella;
среду не следует использовать как единственную селективную среду для выделения сальмонелл;
виды Shigella преимущественно ингибируются;
ингибируются некоторые представители Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus;
виды Proteus преимущественно ингибируются, однако отдельные штаммы формируют тускло-зелёные или коричневые колонии с металлическим блеском.

Контроль качества

Внешний вид компонентов

Часть A: от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета, однородный сыпучий порошок.
Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 2,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри формируется зеленовато-жёлтый опалесцирующий гель с хлопьевидным осадком.

Культуральные характеристики

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с IP. Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновой агаризованной среде.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Наблюдаемое значение, КОЕ	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации
Тест на указанный микроорганизм
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	обильный	25–100	≥50 %	чёрная или зелёная колония	18–24 ч
Salmonella Abony NCTC 6017	50–100	обильный	25–100	≥50 %	чёрная или зелёная колония	18–24 ч
Дополнительное микробиологическое исследование культуральных характеристик
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	обильный	25–100	≥50 %	чёрная или зелёная колония	18–24 ч
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	обильный	25–100	≥50 %	чёрная или зелёная колония	18–24 ч
Enterobacter aerogenes ATCC 13048	50–100	отсутствующий или слабый	0–10	0–10 %	от коричневой до зелёной, зависит от плотности посевной дозы	18–24 ч
Escherichia coli NCTC 9002	50–100	отсутствующий или слабый	0–10	0–10 %	от коричневой до зелёной, зависит от плотности посевной дозы	18–24 ч
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	отсутствующий или слабый	0–10	0–10 %	от коричневой до зелёной, зависит от плотности посевной дозы	18–24 ч
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	отсутствующий или слабый	0–10	0–10 %	коричневая	18–24 ч
Enterococcus faecalis ATCC ≥10³ 29212		ингибирован	0	0 %		18–24 ч