HiMedia MM027-100G Висмут-сульфитный агар (Twin Pack)

Питательная агаровая среда HiMedia MM027-100G Висмут-сульфитный агар (Twin Pack) — сухая среда массой 100 г для микробиологических исследований. Применяется для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonellae в патологическом материале, сточных водах, воде, пищевых продуктах и других образцах, но не должна использоваться как единственная селективная среда для всех штаммов Salmonella.

Назначение

Висмут-сульфитный агар рекомендован для селективного выделения и идентификации Salmonellae в соответствии с требованиями Индийской фармакопеи 1996 года (IP). Среда представляет собой модификацию среды Вильсона—Блэра.

Среда предназначена для работы с патологическим материалом, сточными водами, водой, пищевыми продуктами и другими продуктами. Она допускает использование большей посевной дозы и сильно загрязнённых образцов по сравнению с другими селективными средами благодаря выраженному ингибирующему действию в отношении грамположительных и колиформных микроорганизмов.

Состав

Расход компонентов указан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 40,4 г части A (раствора 1) в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте раствор при температуре 115 °C в течение 30 мин.
4. Суспендируйте 22,54 г части B — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л — в 100 мл дистиллированной воды.
5. Нагрейте раствор части B до кипения для полного растворения среды.
6. Не подвергайте раствор части B автоклавированию.
7. Добавьте один объём раствора части B к десяти объёмам предварительно расплавленного и охлаждённого до 55 °C раствора части A.
8. Перед разливом в стерильные чашки Петри равномерно диспергируйте осадок сульфита висмута в готовом геле. Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерности распределения этого осадка.

Выдержка перед применением

Приготовленную среду следует хранить при 2–8 °C в течение 5 дней до использования.

Принцип действия и интерпретация

Бриллиантовый зелёный и сульфит висмута, входящие в состав среды, подавляют рост кишечных грамотрицательных и грамположительных бактерий. Пептон и мясной экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами.

Ферментируемым источником углеводов служит декстроза, обеспечивающая энергию для усиленного роста микроорганизмов. Фосфаты выполняют функцию буферного компонента. Ионы висмута восстанавливаются до металлического висмута, который формирует металлический блеск вокруг колоний. Сульфит восстанавливается до чёрного сульфида железа с выделением H₂S, что вызывает чёрное окрашивание.

Типичная морфология колоний:

• Salmonella Enteritidis и Salmonella Typhimurium обычно образуют чёрные колонии, напоминающие «глаз кролика», с окружающим металлическим блеском.
• Salmonella Paratyphi A образует светло-зелёные колонии.
• Большинство видов Shigella подавляется на этой среде.
• Некоторые Salmonellae, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equally, также подавляются.
• Виды Proteus подавляются, однако отдельные штаммы могут формировать тусклые зелёные или коричневые колонии с металлическим блеском.

Среда может подавлять рост некоторых штаммов Salmonella, поэтому её не следует использовать как единственную селективную среду для выделения этих микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид компонентов

• Часть A: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Часть B: однородный, свободно сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 2,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри формируется гель зеленовато-жёлтого цвета с опалесценцией и хлопьевидным осадком.

Культуральные характеристики

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с IP. Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Коэффициент восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.