Агар EMB, Levine (Levine - агар с эозином и метиленовым синим (EMB) среда) (In accordance с IP 2007) HiMedia MM022-100G (100 г)

Порошковая микробиологическая питательная среда агар EMB Левина HiMedia MM022-100G (100 г) содержит эозин Y и метиленовый синий. Среда предназначена для выделения, количественного учёта и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae, а также подавляет рост некоторых грамположительных бактерий.

Назначение и применение

Среду применяют для выделения, количественного учёта и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae и группы колиформных бактерий. Она также используется для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а при добавлении гидрохлорида хлортетрациклина — для быстрой идентификации Candida albicans в клинических образцах.

Состав среды соответствует Индийской фармакопее 2007 года. Среда рекомендована для обнаружения, количественного учёта и дифференциации колиформных бактерий Американской ассоциацией общественного здравоохранения и Индийской фармакопеей.

Состав

Количественное содержание компонентов указано в г/л; значение pH приведено для стерилизации при 25 °C.

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения требуемых рабочих характеристик.

Принцип действия

Эозин Y и метиленовый синий придают среде слабую селективность и подавляют рост некоторых грамположительных бактерий. Оба красителя выполняют функции индикаторов и ингибирующих агентов, дифференцируя бактерии, ферментирующие лактозу, и неферментирующие бактерии. При кислом pH эозин Y и метиленовый синий образуют комплекс, который действует как ингибирующий агент.

Панкреатический гидролизат желатина обеспечивает среду необходимыми питательными веществами и факторами роста, а фосфаты выполняют функцию буферной системы. Escherichia coli образует колонии с металлическим зелёным блеском, что указывает на интенсивную ферментацию лактозы.

Некоторые грамположительные бактерии, в том числе фекальные стрептококки, а также дрожжи могут расти на этой среде, образуя точечные колонии. Для быстрой идентификации Candida albicans в клинических образцах предложено использовать агар EMB Левина с добавлением гидрохлорида хлортетрациклина. Предварительную идентификацию Candida albicans можно проводить после инкубации в течение 24–48 ч при 35–37 °C в атмосфере с 10 % CO₂. В качестве образцов могут использоваться кал, выделения из ротовой полости и влагалища, соскобы с ногтей или кожи. Типичный внешний вид колоний может варьироваться.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин под давлением около 0,10 МПа либо в соответствии с валидированным циклом. Не допускайте перегрева.
4. Охладите среду до 50 °C и встряхните, чтобы окислить метиленовый синий и восстановить его синюю окраску, а также суспендировать осадок, который является необходимой частью среды.
5. Перед разливом по стерильным чашкам Петри тщательно перемешайте.

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный, сыпучий, от светло-розового до фиолетового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, приготовленным из 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: красновато-фиолетовый опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в чашках Петри.
• pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Ростовые свойства проверяют в соответствии с Индийской фармакопеей. Результаты учитывают после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления указана относительно роста бактерий на агаре с переваром соевой муки и казеина, для которого принимают значение 100 %.