HiMedia MM016-500G Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым

Микробиологическая питательная среда HiMedia MM016-500G Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым представляет собой порошковый агар массой 500 г для селективного выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi. Применяется для микробиологического анализа пищевых продуктов, молочных продуктов, воды и фармацевтических образцов; высокая селективность среды может подавлять рост Salmonella Typhi и видов Shigella.

Назначение

Среда рекомендована для первичного селективного выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi, из:

• фекалий;
• пищевых продуктов;
• молочных продуктов;
• воды;
• фармацевтических образцов.

Среда применяется для исследования клинических образцов, испытаний на микробиологические пределы, а также для анализа пищевых и фармацевтических продуктов совместно с новобиоцином. Рецептура соответствует Индийской фармакопее (IP), издание 2007 года.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный агар с бриллиантовым зелёным используется как первичная посевная среда для выделения видов Salmonella. Среда была впервые описана Kristensen и соавторами как среда для дифференциации паратифа B от других грамотрицательных кишечных бактерий, а затем модифицирована Kauffmann для выделения Salmonella из образцов кала.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают питательную основу среды, являясь источниками углеродсодержащих и азотсодержащих соединений, аминокислот и длинноцепочечных пептидов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза и сахароза служат ферментируемыми источниками углеводов. Феноловый красный используется как кислотно-основный индикатор: у бактерий, ферментирующих лактозу и/или сахарозу, он вызывает жёлтое окрашивание.

Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. В основном подавляется рост:

• Salmonella Typhi;
• видов Shigella;
• Escherichia coli;
• видов Proteus;
• видов Pseudomonas;
• Staphylococcus aureus.

Из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать вместе с менее ингибирующей средой для повышения вероятности выделения микроорганизмов.

Методика проведения анализа

1. Для образцов пищевых и молочных продуктов выполняйте отбор и обработку проб в соответствии с применимыми методиками.
2. Для образцов воды выполняйте отбор и обработку проб в соответствии с применимыми методиками и местными нормативными требованиями.
3. Приготовьте среду: суспендируйте 50,09 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
4. Нагрейте суспензию до кипения, чтобы полностью растворить среду.
5. Простерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
6. Не допускайте перегрева среды.
7. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
8. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.
9. После использования загрязнённые материалы простерилизуйте автоклавированием перед утилизацией.

Схема обогащения и посева

Культуры обогащают в питательном бульоне (MM244), затем переносят в селективный бульон на основе селенита F (MM052) или в желчно-тетратионатный бульон с бриллиантовым зелёным (MM1255). После этого выполняют посев как минимум на две из следующих селективных сред:

• модифицированный агар с бриллиантовым зелёным (MM016);
• висмут-сульфитный агар (MM027);
• ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (MM031);
• дезоксихолат-цитратный агар (MM065).

Тип образцов

• Пищевые продукты и молочные образцы.
• Образцы воды.
• Фармацевтические образцы.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

Материалы, загрязнённые после использования, необходимо автоклавировать перед утилизацией.

Ограничения и мешающие факторы

1. Несмотря на селективность среды в отношении Salmonella, на ней могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
3. Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.
4. Предположительно положительные изоляты Salmonella необходимо дополнительно подтверждать.
5. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не выявляться из-за ингибирующего действия среды.
6. Для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов рекомендуется параллельно использовать менее ингибирующую питательную среду.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральную реакцию определяли в соответствии с Индийской фармакопеей после инкуба