HiMedia MM016-100G Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым

Агар HiMedia MM016-100G Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым — порошковая селективная питательная среда для микробиологического анализа, содержащая 0,0125 г/л бриллиантового зелёного. Модифицированный агар с бриллиантовым зелёным применяют для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из фекалий, пищевых продуктов, молочных продуктов, воды и фармацевтических образцов; Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.

Назначение и область применения

Среда предназначена для первичного посева и селективного выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi, из следующих образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• образцы воды;
• фармацевтические образцы;
• клинические образцы;
• образцы в рамках испытаний на микробиологические пределы;
• пищевые и фармацевтические продукты при использовании совместно с новобиоцином.

Состав среды соответствует Индийской фармакопее IP 2007. Среду применяют для анализа образцов с высокой микробной обсеменённостью и больших посевных доз благодаря высокой селективности.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Модифицированный агар с бриллиантовым зелёным используется как первичная селективная среда для выделения видов Salmonella. Среда впервые описана Kristensen и соавторами как среда для дифференциации паратифа B от других грамотрицательных энтеробактерий; позднее Kauffmann модифицировал её для выделения Salmonella из образцов кала.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают питательную ценность среды, являясь источниками углеродсодержащих и азотсодержащих соединений, аминокислот и длинноцепочечных пептидов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза и сахароза служат ферментируемыми источниками углеводов. Феноловый красный является кислотно-основным индикатором и окрашивает среду в жёлтый цвет при ферментации лактозы и/или сахарозы бактериями.

Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. В основном подавляется рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, видов Proteus, видов Pseudomonas и Staphylococcus aureus.

Из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей питательной средой для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов.

Методика подготовки среды

1. Суспендируйте 50,09 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Схема выделения сальмонелл

Культуры обогащают в питательном бульоне (MM244), затем переносят в детективный селенитовый F-бульон (MM052) или тетратионат-жёлчно-бриллиантово-зелёный бульон (MM1255). После этого выполняют посев как минимум на две из следующих селективных сред:

• агар с бриллиантовым зелёным (MM016);
• бисмут-сульфитный агар (MM027);
• ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (MM031);
• дезоксихолат-цитратный агар (MM065).

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения и мешающие факторы

1. Несмотря на селективность среды для Salmonella, на ней могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
3. Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.
4. Предположительно положительные изоляты Salmonella необходимо дополнительно подтверждать.
5. Для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов среду следует применять совместно с менее ингибирующей средой.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение: животное
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• pH после стерилизации: 6,9 ± 0,2
• Рабочий диапазон pH по контролю качества: 6,70–7,10

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли в соответствии с IP после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления для роста бактерий на соево-казеиновом агаре принята за 100 %.

* Соответствующие номера WDCM.

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• После приготовления храните среду при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжиган