Питательная среда HiMedia MH581-5KG Фиолетово-красный желчный глюкозный агар — сухой селективный агар для выявления и количественного определения энтеробактерий. Применяется при контроле фармацевтических образцов, при этом для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические и серологические исследования.

Назначение

Фиолетово-красный желчный глюкозный агар предназначен для выявления и количественного определения Enterobacteriaceae, особенно грамотрицательных бактерий, устойчивых к желчи, в фармацевтических образцах и лекарственных препаратах, не являющихся стерильными.

Среда применяется в соответствии с испытанием на указанные микроорганизмы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Состав

Состав на 1 л:

Пептон из желатина: панкреатический перевар желатина.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим характеристикам среды.

Принцип действия и интерпретация

Пептон из желатина и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими питательными веществами, необходимыми для бактериального метаболизма.

Селективность среды обусловлена присутствием ингибиторов:

• желчные соли ингибируют грамположительные микроорганизмы, особенно стафилококки;
• кристаллический фиолетовый ингибирует грамотрицательные микроорганизмы.

Нейтральный красный служит индикатором ферментации глюкозы. Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют красные колонии с розово-красными ореолами в присутствии нейтрального красного. Красный цвет обусловлен поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию из 40,62 г сухой среды на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не нагревайте среду в автоклаве.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Исследуемый материал

Тип образца: фармацевтические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.

При работе с образцами и культурами соблюдайте следующие требования:

• используйте защитные перчатки;
• используйте защитную одежду;
• используйте средства защиты глаз;
• используйте средства защиты лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• при обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами;
• требования безопасности уточняйте в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Хотя среда предназначена для селективного выделения Enterobacteriaceae, для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.
2. Передержка при инкубации может привести к обратному изменению реакции.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.

pH: 7,20–7,60.

Испытание ростовых свойств

Испытание ростовых свойств проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % относительно роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Ростовые свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре в течение периода, не превышающего минимальное указанное время, при внесении инокулюма не более 100 КОЕ: при 30–35 °C в течение не более 18 ч.

Индикаторные свойства

Колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, ранее полученными на предварительно испытанной и одобренной серии среды, при заданной температуре в течение времени в установленном диапазоне и при внесении инокулюма не более 100 КОЕ: при 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Культуральная реакция

Дополнительное микробиологическое испытание

Примечание: обозначения в скобках () соответствуют номерам WDCM.*

Р