Питательная селективная агаризованная среда HiMedia MH581-2.5KG Фиолетово-красный желчный глюкозный агар производства HiMedia предназначена для микробиологического анализа фармацевтических образцов. Среда используется для обнаружения и количественного определения Enterobacteriaceae; сухую среду нельзя нагревать в автоклаве, а хранить необходимо при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Назначение

Фиолетово-красный желчный глюкозный агар применяется для обнаружения и количественного определения Enterobacteriaceae, особенно устойчивых к желчи грамотрицательных бактерий, в фармацевтических продуктах и препаратах, не являющихся стерильными. Методика предназначена для испытаний на указанные микроорганизмы по гармонизированной методологии USP/EP/BP/JP/IP.

Технические характеристики

• Тип продукта: агаризованная питательная среда
• Форма выпуска: сухой сыпучий порошок
• Масса: 2,5 кг
• Образцы: фармацевтические образцы
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Значение pH после нагревания при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Значение pH приготовленной среды: 7,20–7,60
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: красновато-фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри

Состав

Количество компонентов указано на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Пептон из панкреатического переваривания желатина

Принцип действия и интерпретация результатов

Питательные компоненты среды — пептон из панкреатического переваривания желатина и дрожжевой экстракт — обеспечивают микроорганизмы азотсодержащими и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими веществами, необходимыми для бактериального метаболизма.

Селективность среды обусловлена ингибирующим действием желчных солей и кристаллического фиолетового. Эти компоненты подавляют рост грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов соответственно, особенно стафилококков. Нейтральный красный служит индикатором ферментации глюкозы.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют красные колонии с розово-красными ореолами в присутствии нейтрального красного. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Красная окраска возникает вследствие поглощения нейтрального красного и последующего изменения цвета красителя при снижении значения pH среды ниже 6,8.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 40,62 г сухой среды, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не нагревайте среду в автоклаве.
4. Охладите раствор до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и гармонизированной методологией испытаний USP/EP/BP/JP/IP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применяемыми руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Несмотря на то что среда предназначена для селективного выделения Enterobacteriaceae, для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические испытания.
2. Продолжительная инкубация может привести к обратному изменению реакции.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовато-бежевый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется красновато-фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Значение pH

7,20–7,60.

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста проводят в соответствии с гармонизированной методологией USP/EP/BP/JP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–24 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % относительно роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Ростовые свойства

Рост микроорганизмов должен быть сопоставим с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и утверждённой серии среды, при заданной температуре в течение периода, не превышающего минимальное установленное время, при посевной дозе ≤100 КОЕ: 30–35 °C, ≤18 ч.

Индикаторные свойства

Колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, ранее полученными на предварительно испытанной и утверждённой серии среды, при заданной температуре в течение времени, соответствующего установленному диапазону, при посевной дозе ≤100 КОЕ: 30–35 °C, 18–24 ч.

Культуральная реакция

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации в течение 18–24 ч.