Питательная микробиологическая среда HiMedia MH144-5KG Колумбийский агар — сухая агаровая среда для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтической продукции. Среда применяется для обогащения и последующего выделения клостридий в анаэробных условиях; масса упаковки составляет 5 кг.

Назначение

Колумбийский агар рекомендован для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтической продукции при микробиологическом испытании на соответствие требованиям гармонизированной методики USP/EP/BP/JP/IP, среда 15.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Триптон: панкреатический перевар казеина

Экстракт HM: пептический перевар мяса

Гидролизат HM: панкреатический перевар сердца

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик эффективности.

После стерилизации при необходимости отрегулируйте pH до значения 7,3 ± 0,2.

pH также можно измерять после стерилизации при температуре 25 °C.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки FD252.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийская кровяная агаровая основа была разработана Эллнером и соавторами из Колумбийского университета как универсальная питательная среда; впоследствии среду обогатили добавлением крови барана.

Среда может использоваться для выделения микроорганизмов при добавлении различных добавок. Колумбийский агар приготовлен в соответствии с гармонизированной методикой микробиологического испытания USP/EP/BP/JP/IP.

Среда рекомендована для проверки наличия Clostridium в нестерильных продуктах, включая пищевые продукты, диетические и пищевые добавки, а также связанные с ними изделия. Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae и классу Clostridia.

Исследуемый продукт первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, создающие анаэробные условия и обеспечивающие рост анаэробных микроорганизмов. Обогащённую пробу затем пересеивают на колумбийский агар.

Колумбийский агар используют как основу для сред, содержащих кровь, а также для селективных составов, в которых в качестве добавок применяются различные комбинации противомикробных веществ.

Питательные свойства среды обеспечиваются следующими компонентами:

• триптон, экстракт HM и гидролизат HM обеспечивают питательные вещества;
• дрожжевой экстракт служит источником углеродистых и азотистых соединений, длинноцепочечных аминокислот, витаминов группы B и других необходимых компонентов для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются.

Среда применяется для выявления Clostridia в фармацевтической продукции. Селективная добавка FD252 подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и виды Staphylococcus.

Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную каталазную реакцию. Для полной идентификации проводят дополнительные идентификационные тесты.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов необходимо использовать соответствующие методы отбора и подготовки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различные варианты роста на этой среде.
2. Каждая партия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Пользователям рекомендуется валидировать среду для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, с учётом индивидуальных требований к испытанию.
3. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

pH

pH: 7,10–7,50.

Испытание на стимуляцию роста

Испытание на