Питательная микробиологическая среда Колумбийский агар HiMedia MH144-500G (500 г) — сухой агар для приготовления культуральной среды. Среда предназначена для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических образцах по гармонизированной методике испытаний на микробиологическую чистоту; после стерилизации среда имеет pH 7,3 ± 0,2.

Назначение

Колумбийский агар применяют для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических продуктах в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологическую чистоту по USP/EP/BP/JP/IP, среда 15.

Среда также предназначена для проверки наличия Clostridium в нестерильных продуктах, включая пищевые продукты, диетические и пищевые добавки, а также связанные с ними изделия. Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Состав, г/л:

Триптон: панкреатический перевар казеина

Экстракт HM: пептический перевар мяса

Гидролизат HM: панкреатический перевар сердца

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

pH среды

При необходимости отрегулируйте pH так, чтобы после стерилизации он составлял 7,3 ± 0,2. pH также можно измерять после стерилизации при 25 °C.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки для генетического отбора Gen Selective Supplement (FD252).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийская кровяная агаровая основа была разработана Эллнером и соавторами из Колумбийского университета как универсальная питательная среда; позднее среду обогащали добавлением крови овцы. Основу также используют для выделения микроорганизмов при добавлении различных добавок.

Колумбийский агар приготовлен в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологическую чистоту по USP/EP/BP/JP/IP. Среду применяют как основу для сред с кровью и селективных составов, в которых используют различные комбинации противомикробных веществ.

Питательные свойства среды обусловлены следующими компонентами:

• триптон, экстракт HM и гидролизат HM обеспечивают питательными веществами;
• дрожжевой экстракт является источником углеродистых и азотистых веществ, длинноцепочечных аминокислот, витаминов группы B и других необходимых компонентов для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются.

Для фармацевтических продуктов образец первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, создающие анаэробные условия и обеспечивающие рост анаэробных микроорганизмов. Обогащённый образец затем пересевают на колумбийский агар.

Селективная добавка Gen Selective Supplement (FD252) подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и виды Staphylococcus. Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную реакцию на каталазу. Для полной идентификации проводят дополнительные идентификационные тесты.

Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae и классу Clostridia.

Тип образца и обращение с ним

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Наименование: колумбийский агар
• Артикул: MH144-500G
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: агар
• Масса: 500 г
• Расход при приготовлении: 44,0 г/1000 мл
• pH после стерилизации: 7,3 ± 0,2
• Контрольный диапазон pH: 7,10–7,50
• Температура охлаждения перед внесением добавки: 45–50 °C
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) либо по валидированному циклу
• Условия селективного роста: анаэробные
• Условия теста стимуляции роста: 30–35 °C, 24–48 ч
• Характер готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

pH

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Тест стимуляции роста

Стимуляцию роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Рост оценивают в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Коэффициент восстановления считают равным 100 % для роста бактерий на агаре с переваром казеина и соевых бобов (агаре с переваром соевых бобов и казеина).

Ростостимулирующие свойства

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным для протестированной и утверждённой партии среды, должен наблюдаться при указанной температуре не более чем за минимальный период, установленный для инокуляции ≤100 КОЕ в анаэробных условиях: при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают при инкубации в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

** Ранее обозначался как Bacteroides vulgatus.

Требования безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с