Питательная агаризованная среда HiMedia MH144-2.5KG Колумбийский агар с массой упаковки 2,5 кг. Колумбийский агар предназначен для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических образцах и хранится при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение

Колумбийский агар рекомендован для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических продуктах при микробиологическом контроле по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP (среда 15).

Тип образца

Фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Панкреатический перевар казеина

Мясной пептический перевар

Сердечный панкреатический перевар

Корректировка pH

При необходимости значение pH корректируют так, чтобы после стерилизации оно составляло 7,3 ± 0,2. Измерение pH также допускается проводить после стерилизации при 25 °C.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунт-сил на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки Gen Selective Supplement (FD252).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийская кровяная агаровая основа разработана Ellner из Колумбийского университета как универсальная питательная среда; впоследствии её обогащали добавлением крови овцы. Среда также может использоваться для выделения микроорганизмов при добавлении различных добавок.

Колумбийский агар приготовлен в соответствии с гармонизированной методикой микробиологического контроля USP/EP/BP/JP/IP. Среда рекомендована для проверки присутствия Clostridium в нестерильных продуктах, включая пищевые продукты, диетические и питательные добавки, а также связанные с ними изделия. Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae класса Clostridia.

Исследуемый продукт первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, создающие анаэробные условия и обеспечивающие рост анаэробных микроорганизмов. Затем обогащённый образец пересевают на колумбийский агар.

Колумбийский агар используют как основу для сред с кровью и селективных сред, в состав которых в качестве добавок входят различные комбинации противомикробных агентов. Среда обладает высокой питательностью благодаря триптону, экстракту HM и гидролизату HM. Дрожжевой экстракт обеспечивает поступление углеродистых и азотистых веществ, длинноцепочечных аминокислот, витаминов группы B и других необходимых питательных компонентов для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются. Среда применяется для выявления Clostridia в фармацевтических продуктах.

Селективная добавка Gen Selective Supplement (FD252) подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и виды Staphylococcus. Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную каталазную реакцию. Для полной идентификации проводят дополнительные идентификационные тесты.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам. После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Для получения дополнительных указаний по безопасности обращайтесь к соответствующим паспортам безопасности.

Ограничения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на этой среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Пользователям рекомендуется валидировать среду для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, с учётом индивидуальных требований.
3. Для полной идентификации необходимо проводить дополнительные биохимические тесты.

Показатели эффективности

Показатели эффективности среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

pH

7,10–7,50.

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста выполнено в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Рост оценивали в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на казеиново-соевой агаровой среде, также называемой агаром с переваром соевых бобов и казеина.

Ростостимулирующие свойства

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не более чем за минимальный установленный период времени. Посевная доза должна составлять ≤100 КОЕ; инкубацию проводят в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.