Питательная микробиологическая среда HiMedia MH144-100G Колумбийский агар — сухая агаризованная среда массой 100 г для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтической продукции. Колумбийский агар применяют для культивирования анаэробных микроорганизмов после обогащения пробы, при этом готовую среду хранят при 20–30 °C, а сухую среду — при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтической продукции при испытаниях на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP, среда 15.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Состав, г/л:

Панкреатический перевар казеина

Пептический перевар мяса

Панкреатический перевар сердца

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки Gen Selective Supplement (FD252).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

При необходимости отрегулируйте pH так, чтобы после стерилизации он составлял 7,3±0,2. pH также можно измерять после стерилизации при 25 °C.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийская кровяная агаровая основа была разработана Ellner и сотрудниками Колумбийского университета как универсальная питательная среда, позднее обогащённая добавлением крови барана. Среду также используют для выделения микроорганизмов при добавлении различных селективных добавок.

Колумбийский агар подготовлен в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологические пределы USP/EP/BP/JP/IP. Среда рекомендована для проверки наличия Clostridium в нестерильной продукции, включая пищевые продукты, диетические и питательные добавки и связанные с ними изделия. Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae класса Clostridia.

Исследуемый продукт первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, которые создают анаэробные условия и обеспечивают рост анаэробных микроорганизмов. Обогащённую пробу затем пересевают на колумбийский агар.

Колумбийский агар используют как основу для сред с кровью, а также для селективных сред, в состав которых в качестве добавок входят различные комбинации противомикробных агентов. Высокая питательность среды обусловлена содержанием триптона, экстракта HM и гидролизата HM. Дрожжевой экстракт обеспечивает углеродистые и азотистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины группы B и другие необходимые питательные вещества для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются.

Среду применяют для выявления Clostridia в фармацевтической продукции. Селективная добавка Gen Selective Supplement (FD252) подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и виды Staphylococcus. Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную реакцию на каталазу. Для полной идентификации проводят дополнительные идентификационные тесты.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MH144-100G
• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Форма выпуска: кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри
• pH: 7,10–7,50
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В чашках Петри образуется светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

pH

7,10–7,50.

Тест на ростовые свойства

Испытание ростовых свойств проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Рост оценивают в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Коэффициент восстановления считают равным 100 % для роста бактерий на казеин-соевой переварной агаровой среде (соево-казеиновой переварной агаровой среде).

Ростостимулирующие свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не более чем за минимальный установленный период времени. Посевную дозу устанавливают на уровне ≤100 КОЕ; инкубацию проводят в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают при инкубации в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

** Ранее обозначался как Bacteroides vulgatus.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различные характеры роста на этой среде.
2. Каждая партия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные би