Маннит-солевой агар HiMedia MH118-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда Маннит-солевой агар HiMedia MH118-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — селективный агар с содержанием хлорида натрия 7,5 %. Маннит-солевой агар применяется для селективного выделения стафилококков из фармацевтических образцов и дифференциации микроорганизмов по ферментации маннита с использованием фенолового красного.

Назначение

Маннит-солевой агар HiMedia MH118-500G предназначен для селективного выделения стафилококков из фармацевтических образцов в рамках испытания на микробиологическую чистоту по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Среда также применяется для выделения коагулазоположительных стафилококков из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов.

Состав

Масса сухой среды: 111,02 г на 1 л приготовленной среды.

Пептон: пептический перевар тканей животного происхождения.

Триптон: панкреатический перевар казеина.

Пептон HM B: эквивалент мясного экстракта.

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных рабочих характеристик среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 111,02 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин или по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Условия хранения сухой среды

Среда содержит 7,5 % хлорида натрия. При многократном контакте с воздухом и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки. Храните продукт в плотно закрытой ёмкости в сухом месте, защищённом от яркого света.

Принцип действия и интерпретация

Стафилококки широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, кожных железах и слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является признанным условно-патогенным микроорганизмом человека.

Способность свёртывать плазму остаётся широко применяемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями. Стафилококки обладают способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Выделение коагулазоположительных стафилококков на маннитно-фенол-красном агаре с добавлением 7,5 % NaCl было изучено Чапманом.

Маннит-солевой агар предназначен для выделения коагулазоположительных стафилококков. Дополнительное свойство Staphylococcus aureus — липазную активность — можно выявить добавлением эмульсии яичного желтка FD045. Липазная активность проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Среда также используется при проведении испытаний на микробиологическую чистоту для селективного выделения стафилококков. Состав среды соответствует гармонизированным требованиям USP/EP/BP/JP/IP как основе применяемой методики.

Пептон HM B, триптон и пептон обеспечивают среду питательными веществами, включая углеродсодержащие и азотсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины, другие необходимые факторы роста и микроэлементы. Многие бактерии, кроме стафилококков, подавляются хлоридом натрия в концентрации 7,5 %.

Маннит является ферментируемым углеводом. Его ферментация приводит к образованию кислоты, которая определяется по изменению окраски индикатора фенолового красного.

Staphylococcus aureus ферментирует маннит, образуя жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазоотрицательные штаммы Staphylococcus aureus обычно не ферментируют маннит и образуют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии Staphylococcus aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом — пробирочным или на предметном стекле. Липазную активность Staphylococcus aureus определяют после добавления эмульсии яичного желтка.

Возможный Staphylococcus aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом. Кроме того, микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, чтобы избежать возможного влияния соли на коагулазный тест или другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.

Некоторые штаммы Staphylococcus aureus могут демонстрировать замедленную ферментацию маннита. Поэтому отрицательные результаты необходимо повторно инкубировать ещё 24 ч перед утилизацией образцов.

Тип образца

Тип образца: фармацевтические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам USP/EP/BP/JP/IP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Форма выпуска: сухая питательная агаровая среда.
• Назначение изделия: агар.
• Масса упаковки: 500 г.
• Растворение: 111,02 г в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
• Содержание хлорида натрия: 7,5 %.
• pH после стерилизации, при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• pH приготовленной среды: 7,20–7,60.
• Цвет сухого продукта: от светло-жёлтого до розового.
• Внешний вид сухого продукта: однородный, сыпучий порошок.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок хранения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

pH

7,20–7,60.

Испытание ростовых свойств

Испытание ростовых свойств проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновой агаровой среде.

Ростовые свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным для испытанной и утверждённой партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре в течение периода, не превышающего минимально установленный, при посевной дозе ≤100 КОЕ: 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Индикаторные свойства

Внешний вид колоний и индикаторная реакция должны быть сопоставимы с результатами, ранее полученными для испытанной и утверждённой партии среды, при заданной температуре в течение периода, находящегося в установленном диапазоне, при посевной дозе ≤100 КОЕ: 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестового микроорганизма не должен наблюдаться при заданной температуре в течение периода не менее максимально установленного, при посевной дозе ≥100 КОЕ: 30–35 °C в течение ≥72 ч.