HiMedia MH081-5KG Агар МакКонки

Обезвоженная питательная среда HiMedia MH081-5KG Агар МакКонки для микробиологического анализа, масса упаковки — 5 кг. Агар МакКонки применяют для селективного выделения и дифференциации Escherichia coli и других энтеробактерий в фармацевтических, пищевых, молочных и водных образцах; рабочая температура хранения продукта — 10–30 °C.

Назначение

Агар МакКонки предназначен для селективного выделения и дифференциации Escherichia coli и других кишечных бактерий из фармацевтических препаратов при микробиологическом испытании на пределы содержания микроорганизмов по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Среда также применяется для:

• микробиологического исследования пищевых продуктов и молочных изделий;
• прямого посева проб воды для количественного определения колиформных бактерий;
• микробиологического анализа фармацевтических препаратов;
• контроля роста и дифференциации грамотрицательных бактерий.

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Желатиновый пептон эквивалентен панкреатическому перевару желатина.

Пептон HMC эквивалентен пептонам мясного и казеинового происхождения.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 49,53 г обезвоженной среды, рассчитанных на 1 л готовой среды, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Кипятите в течение 1 мин при постоянном перемешивании.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.
7. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар МакКонки является селективной и дифференциальной средой для культивирования колиформных микроорганизмов.

Желатиновый пептон и пептон HMC обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами, витаминами и азотистыми факторами, требуемыми для роста.

Лактозы моногидрат служит ферментируемым источником углеводов.

Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, которые ингибируют большинство видов грамположительных бактерий.

Натрия хлорид поддерживает осмотический баланс среды.

После обогащения Escherichia coli в бульоне МакКонки MH083 проводят пересев на агар МакКонки. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу.

Штаммы, ферментирующие лактозу, образуют красные или розовые колонии, которые могут быть окружены зоной осаждённых кислотой желчных солей. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Yersinia enterocolitica после инкубации при комнатной температуре может образовывать мелкие колонии, не ферментирующие лактозу.

Типы образцов

• Фармацевтические образцы.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методикам микробиологического исследования пищевых продуктов и молочных изделий.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб для микробиологического анализа воды и количественного определения колиформных бактерий.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на данной среде.
2. Каждая серия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется провести валидацию в соответствии с индивидуальными требованиями пользователя.
3. Несмотря на рекомендации по селективному выделению, для окончательного подтверждения необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.
4. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Эффективность и оценка

Эффективность среды обеспечивается при приготовлении и использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с фиолетовым оттенком.

pH

6,90–7,30.

Культуральная реакция

Определение стимулирующих рост свойств выполняют в соответствии с гармонизированной методикой ICH (USP/EP/BP/JP).

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Степень восстановления принимают за 100 % относительно роста бактерий на агаре с переваром соево-казеиновой среды.

Стимулирующие рост свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального времени, установленного для инкубации, при посевной дозе 100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C в течение не более 18 ч.

Индикаторные свойства

Колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, ранее полученными на испытанной и одобренной серии среды, при заданной температуре в течение периода, входящего в установленный диапазон, при посевной дозе не более 100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Культуральные характеристики: