Питательная микробиологическая среда HiMedia MH081-2.5KG Агар МакКонки — порошковая среда для селективного выделения и дифференциации E. coli и других кишечных бактерий. Применяется при микробиологическом контроле фармацевтических, пищевых, молочных и водных образцов; масса упаковки — 2,5 кг.

Назначение

Агар МакКонки предназначен для селективного выделения и дифференциации Escherichia coli и других энтеробактерий из фармацевтических препаратов при микробиологическом контроле в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Среда применяется для:

• микробиологического исследования фармацевтических препаратов;
• микробиологического анализа пищевых и молочных продуктов;
• прямого посева проб воды для количественного определения колиформных бактерий;
• культивирования колиформных организмов.

Агар МакКонки также принят в стандартных методиках исследования молока и молочных продуктов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных эксплуатационных параметров.

Эквивалентен панкреатическому перевариванию желатина.

Эквивалентность компонентов

• Желатиновый пептон эквивалентен панкреатическому перевариванию желатина.
• Пептон HMC эквивалентен пептонам мясного и казеинового происхождения.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 49,53 г сухой обезвоженной среды, что соответствует массе среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Кипятите в течение 1 мин при постоянном перемешивании.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации. Не допускайте перегрева.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.
6. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Давление 15 фунтов/кв. дюйм соответствует ориентировочно 0,103 МПа.

Принцип действия и интерпретация

Агар МакКонки является селективной и дифференциальной средой для культивирования колиформных организмов.

Желатиновый пептон и пептон HMC обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами, витаминами и азотистыми факторами. Лактозы моногидрат служит ферментируемым источником углеводов. Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, ингибирующими большинство видов грамположительных бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

После обогащения Escherichia coli в бульоне МакКонки (MH083) проводят пересев на агар МакКонки. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу.

Штаммы, ферментирующие лактозу, образуют красные или розовые колонии, которые могут быть окружены зоной осаждённых кислотой желчных солей. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды. Yersinia enterocolitica после инкубации при комнатной температуре может образовывать небольшие колонии, не ферментирующие лактозу.

Типы образцов

• Фармацевтические образцы.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам (6–9).

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам (3, 5).

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора проб и обработки согласно установленным руководствам (4).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.
2. Каждая серия среды протестирована на организмы, указанные в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом индивидуальных требований.
3. Несмотря на то что среда рекомендована для селективного выделения, для окончательного подтверждения необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.
4. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Эксплуатационные характеристики и оценка

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с пурпурным оттенком.

pH

6,90–7,30.

Культуральная реакция

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой ICH (USP/EP/BP/JP). Культуральную реакцию наблюдали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соево-казеинового субстрата.

Стимуляция роста

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным на протестированной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального периода времени из указанного диапазона при инокуляции 100 КОЕ: 30–35 °C, не более 18 ч.

Индикаторные свойства

Колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, ранее полученными на протестированной и одобренной серии среды, при заданной температуре в течение периода времени из установленного диапазона и при инокуляции не более 100 КОЕ: 30–35 °C, 18–72 ч.