Селективно-дифференциальная питательная среда HiMedia MH081-100G Агар МакКонки — сухой порошковый агар для выделения и дифференциации кишечных бактерий, масса упаковки 100 г. Применяется для микробиологического контроля фармацевтических, пищевых, молочных и водных образцов; хранится при 10–30 °C.

Назначение

Агар МакКонки предназначен для селективного выделения и дифференциации Escherichia coli и других энтеробактерий из фармацевтических препаратов в рамках испытаний на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Типы исследуемых образцов:

• фармацевтические образцы;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Эквивалент панкреатического переваривания желатина

Эквивалент пептонов

Пептон HMC эквивалентен пептонам мясного и казеинового происхождения.

Приготовление среды

1. Взвесьте 49,53 г сухой обезвоженной среды — эквивалентное количество на 1 л — и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Кипятите 1 мин при постоянном перемешивании.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо в соответствии с валидированным циклом стерилизации.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.
7. Перед инокуляцией поверхность приготовленной среды должна быть сухой.

Принцип действия и интерпретация

Агар МакКонки является селективной и дифференциальной средой для культивирования колиформных микроорганизмов. Агар и бульон МакКонки применяются для микробиологического исследования пищевых продуктов, а также для прямого посева проб воды при определении количества колиформных бактерий. Среда также используется в стандартных методах исследования молока и молочных продуктов. Для фармацевтических препаратов среда применяется в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Желатиновый пептон и пептон HMC обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами, витаминами и азотистыми соединениями. Лактозы моногидрат служит ферментируемым источником углеводов. Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, которые ингибируют большинство видов грамположительных бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

После обогащения Escherichia coli в бульоне МакКонки MH083 выполняют пересев на агар МакКонки. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу.

• Лактозоферментирующие штаммы формируют красные или розовые колонии, которые могут быть окружены зоной осадка желчных солей.
• Красная окраска обусловлена образованием кислоты при ферментации лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски индикатора при снижении pH среды ниже 6,8.
• Неферментирующие лактозу штаммы, например Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.
• Yersinia enterocolitica после инкубации при комнатной температуре может образовывать небольшие колонии, не ферментирующие лактозу.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора проб и обработки согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Несмотря на применение среды для селективного выделения микроорганизмов, для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.
4. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с пурпурным оттенком.

pH

6,90–7,30.

Культуральная реакция

Определение стимуляции роста выполняют в соответствии с гармонизированной методикой ICH (USP/EP/BP/JP). Культуральную реакцию наблюдают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соево-казеиновой среды.

Ростостимулирующие свойства

Рост микроорганизма считается соответствующим требованиям, если он сопоставим с ростом, ранее полученным на протестированной и одобренной партии среды, при заданной температуре и за период, не превышающий минимальное указанное время, при внесении 100 КОЕ. Условия испытания: 30–35 °C, не более 18 ч.

Индикаторные свойства

Колонии считаются соответствующими требованиям, если их внешний вид и индикаторная реакция сопоставимы с результатами, ранее полученными на протестированной и одобренной партии среды, при заданной температуре в течение периода, находящегося в установленном диапазоне, при внесении не более 100 КОЕ. Условия испытания: 30–35 °C, 18–72 ч.

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 30–35 °C в течение указанного периода.

| Организм | Посевная д