HiMedia MH031-2.5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар

HiMedia·Арт.: 0050680·Арт. произв.: MH031-2.5KG

HiMedia MH031-2.5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар

Name: HiMedia MH031-2.5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар
Brand: HiMedia
SKU: 0050680
Price: 52544 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ52 544 руб.

Селективная сухая питательная среда HiMedia MH031-2.5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар для изоляции и подсчёта Salmonella Typhi и других видов Salmonella. Рекомендуется для анализа фармацевтических продуктов в соответствии с гармонизированной методологией USP/EP/BP/JP/IP; вес упаковки 2,5 кг.

Описание

Область применения

Среда предназначена для выделения и идентификации энтерических патогенов, в частности Shigellae, из образцов кала, а также для фармацевтического тестирования и контроля нестерильной продукции на отсутствие Salmonella после предварительного обогащения в бульоне Раппопорта-Вассилиадиса (MH1491) согласно стандартам USP/EP/BP/JP/IP.

Принцип измерения и интерпретация

Среда является селективной и дифференциальной. Дезоксихолат, цитрат аммония-железа и тиосульфат натрия выступают в роли селективных агентов, подавляющих рост грамположительных микроорганизмов. Экстракт дрожжей обеспечивает необходимые питательные вещества и факторы роста.

Дифференциация основана на ферментации сахаров (ксилозы, сахарозы и лактозы):

Ксилоза ферментируется почти всеми энтерическими бактериями, кроме Shigellae.
Salmonellae метаболизируют ксилозу и декарбоксилируют лизин, что приводит к защелачиванию среды (pH смещается в щелочную сторону), имитируя реакцию Shigellae.
Для предотвращения этой реакции лизин-положительными колиформами в среду добавлены избыток лактозы и сахарозы, которые при ферментации образуют кислоты. В результате непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин.
Тиосульфат натрия служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, которая расщепляет его с образованием H₂S.
Тиосульфат натрия и цитрат аммония-железа являются индикаторами H₂S.
Феноловый красный служит индикатором pH.

Интерпретация результатов:

Расщепление сахаров приводит к образованию кислот, что меняет цвет колоний и среды с красного на жёлтый при длительной инкубации.
Образование сероводорода (H₂S) в щелочных условиях приводит к появлению колоний с чёрными центрами.
Защелачивание среды возвращает ей красный цвет.

Состав

Состав, г/л:

Компонент	г/л
Ксилоза	3,500
L-лизин	5,000
Лактоза моногидрат	7,500
Сахароза	7,500
Хлорид натрия	5,000
Экстракт дрожжей	3,000
Дезоксихолат натрия	2,500
Тиосульфат натрия	6,800
Цитрат аммония-железа	0,800
Феноловый красный	0,080
Агар	13,500
pH после нагрева (при 25 °C)	7,4 ± 0,2

Методика приготовления

Суспендируйте 54,8 г сухой среды (эквивалентная масса на 1 литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагревайте при постоянном перемешивании до кипения. ЗАПРЕЩЕНО стерилизовать в автоклаве.
Немедленно перенесите раствор в водяную баню с температурой 50 °C.
После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Примечание: Не рекомендуется готовить большие объемы среды, так как длительный нагрев может привести к выпадению осадка. Незначительный осадок является присущим свойством среды и не влияет на её эффективность.

Технические характеристики

Внешний вид: светло-жёлтый или розовый гомогенный свободнотекучий порошок.
Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,35% агаром.
Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
pH готовой среды: 7,20–7,60.
Температура хранения порошка: 10–30 °C.
Температура хранения готовых чашек: 2–8 °C (рекомендуется для лучшей сохранности) или 20–30 °C.

Ограничения и особенности

Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
Некоторые штаммы Proteus могут давать окрашивание от красного к жёлтому, при этом большинство колоний развивают чёрные центры, что приводит к ложноположительным реакциям.
Неэнтерические бактерии, такие как Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без продукции H₂S, что делает их схожими с видами Shigella.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч. Скорость восстановления считается 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом-пептонном агаре.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Значение лота (КОЕ)	Восстановление	Цвет колонии	Температура инкубации
Стимулирующий рост + Индикативный
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные с чёрными центрами	18–72 ч
Salmonella Abony NCTC 6017	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные с чёрными центрами	18–72 ч
Дополнительные микробиологические тесты
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	удовлетворительный	10–30	20–30 %	жёлтые	18–72 ч
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	удовлетворительный	10–30	20–30 %	жёлтые	18–72 ч
Proteus hauseri ATCC 13315	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	серые с чёрными центрами	18–72 ч
Salmonella Paratyphi A ATCC 9150	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные	18–72 ч
Salmonella Paratyphi B ATCC 8759	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные с чёрными центрами	18–72 ч
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные с чёрными центрами	18–72 ч
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные с чёрными центрами	18–72 ч
Shigella dysenteriae ATCC 13313	50–100	хороший-обильный	25–100	$\ge$ 50 %	красные	18–72 ч
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	удовлетворительный-хороший	15–40	30–40 %	красные	18–72 ч
Shigella sonnei ATCC 25931	50–100	удовлетворительный-хороший	15–40	30–40 %	красные	18–72 ч
Klebsiella aerogenes ATCC 13048	50–100	удовлетворительный	10–30	20–30 %	жёлтые	18–72 ч
Enterobacter cloacae ATCC 13047	50–100	удовлетворительный	10–30	20–30 %	жёлтые	18–72 ч
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923	$\ge$ 10³	подавлен	0	0 %		$\ge$ 72 ч
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538	$\ge$ 10³	подавлен	0	0 %		$\ge$ 72 ч
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge$ 10³	подавлен	0	0 %		$\ge$ 72 ч