Сухая селективная питательная среда HiMedia MH024-5KG Агар с цетримидом предназначена для выделения Pseudomonas aeruginosa и поставляется в упаковке массой 5 кг. Применяется для микробиологического контроля фармацевтических образцов, включая нестерильные лекарственные средства, при рабочем хранении продукта при 10–30 °C.

Назначение

Агар с цетримидом рекомендован для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических продуктов при проведении испытаний на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Среда также применяется для:

• испытаний на микробиологические пределы нестерильных продуктов;
• определения способности микроорганизмов продуцировать флуоресцеин и пиоцианин;
• выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Панкреатический перевар желатина.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар с цетримидом описан King и соавторами. Состав среды соответствует гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Среда используется как селективная для выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических продуктов. Применение цетримид-содержащей среды для селективного выделения Pseudomonas впервые описано Lowbury.

Цетримид — N-ацетил-N,N,N-триметиламмоний бромид — включён в состав среды для подавления роста бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa. Это соединение является катионным детергентом и действует как четвертичное аммониевое соединение, вызывающее высвобождение азота и фосфора из клеток бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa.

Хлорид магния и сульфат калия, входящие в состав среды, усиливают образование пиоцианина — сине-зелёного пигмента, диффундирующего в среду. Это облегчает обнаружение Pseudomonas на агаре. Ионы магния также могут нейтрализовать ЭДТА, если она присутствует в образце.

Желатиновый пептон обеспечивает Pseudomonas необходимыми питательными веществами. Глицерин служит медленно и непрерывно потребляемым источником углерода для растущих клеток.

Для выделения Pseudomonas aeruginosa чашки с агаром с цетримидом следует инокулировать из неселективной среды, например из среды с переваром соевых бобов и казеина MH011. При высокой концентрации микроорганизма исследуемую пробу можно непосредственно инокулировать на агар с цетримидом.

Колонии Pseudomonas aeruginosa могут иметь зелёную пигментацию, которая также выявляется под ультрафиолетовым светом.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,3 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо применяйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

Тип образца: фармацевтические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Эксплуатационные характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании продукта в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,36%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: опалесцирующий гель светло-янтарного цвета с небольшим осадком, образующийся в чашках Петри.

pH

pH: 7,00–7,40.

Испытание на ростовые свойства

Испытание на ростовые свойства проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина.

Ростовые свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным для протестированной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при установленной температуре не позднее минимального периода инкубации, указанного в методике, при внесении посевной дозы ≤100 КОЕ: при 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестируемого микроорганизма не должен наблюдаться при установленной температуре в течение периода, не меньшего максимального времени, указанного в методике, при внесении посевной дозы ≥100 КОЕ: при 30–35 °C в течение ≥72 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина.