Агар с цетримидом HiMedia MH024-500G (уп/500 гр)

Питательная селективная среда Агар с цетримидом HiMedia MH024-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических образцов. Среда применяется при микробиологическом контроле нестерильных лекарственных средств и поставляется в виде порошка массой 500 г.

Назначение

Агар с цетримидом HiMedia MH024-500G предназначен для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических продуктов в соответствии с гармонизированной методикой микробиологического контроля по фармакопеям USP/EP/BP/JP.

Среда также применяется для:

• микробиологического контроля нестерильных продуктов;
• определения способности микроорганизмов продуцировать флуоресцеин и пиоцианин;
• контроля роста и ингибирования тест-микроорганизмов при оценке качества питательной среды.

Тип образцов: фармацевтические образцы.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим параметрам.

# Панкреатический перевар желатина.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар с цетримидом описан King и соавторами. Формула среды соответствует гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Цетримид — N-ацетил-N,N,N-триметиламмоний бромид — введён в состав среды для подавления роста бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa. Цетримид является катионным детергентом и действует как четвертичное аммониевое соединение, вызывая высвобождение азота и фосфора из бактериальных клеток, не относящихся к Pseudomonas aeruginosa.

Хлорид магния и сульфат калия усиливают образование пиоцианина — сине-зелёного пигмента, диффундирующего в среду. Это облегчает обнаружение Pseudomonas на агаре. Ионы магния также могут нейтрализовать ЭДТА, если она присутствует в образце.

Пептонат желатина обеспечивает Pseudomonas необходимыми питательными веществами. Глицерин служит медленно и непрерывно усваиваемым источником углерода для растущих клеток.

Для выделения Pseudomonas aeruginosa чашки с агаром с цетримидом следует инокулировать из неселективной среды, например из соево-казеиновой переварной среды MH011. При высокой концентрации микроорганизмов исследуемый образец можно непосредственно инокулировать на агар с цетримидом.

Колонии Pseudomonas aeruginosa могут иметь зелёную пигментацию, в том числе при наблюдении в ультрафиолетовом свете.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,3 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин или в соответствии с валидированным циклом стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Порошок однородный, свободно сыпучий, от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,36%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета с опалесценцией и небольшим количеством осадка.

pH

pH: 7,00–7,40.

Испытание на ростовые свойства

Испытание ростовых свойств выполняют в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени.

Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом переварном агаре.

Ростовые свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и утверждённой серии среды, должен наблюдаться при установленной температуре не позднее минимального времени инкубации. Посевная доза составляет ≤100 КОЕ; условия испытания — 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестируемого микроорганизма не должен наблюдаться при установленной температуре не ранее максимального времени инкубации. Посевная доза составляет ≥100 КОЕ; условия испытания — 30–35 °C в течение ≥72 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом переварном агаре.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM;
• ^ — ранее использовавшееся название Pseudomonas aeruginosa.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам USP/EP/BP/JP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Из-за гигроскопичности порошка необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.
• Храните среду в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при рекомендуемой