HiMedia MH024-2.5KG Агар с цетримидом

Питательная среда HiMedia MH024-2.5KG Агар с цетримидом — сухой порошок массой 2,5 кг для приготовления селективного агара. Среда предназначена для выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических образцов и проведения микробиологических испытаний нестерильной продукции.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических продуктов при проведении испытаний на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Основа желатинового пептона: панкреатический перевар желатина.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,3 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², примерно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин либо в соответствии с валидированным циклом стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар с цетримидом описан King и соавторами. Формула среды соответствует гармонизированной методике USP/EP/BP/JP и применяется как селективная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических продуктов. Среда также используется для испытаний на микробиологические пределы нестерильной продукции.

Цетримид впервые был применён Lowbury в качестве селективного агента для выделения Pseudomonas. Среда позволяет определять способность микроорганизмов продуцировать флуоресцеин и пиоцианин.

Цетримид — N-ацетил-N,N,N-триметиламмоний бромид — введён в состав среды для подавления роста бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa. Это соединение является катионным детергентом и действует как четвертичное аммониевое соединение, вызывающее высвобождение азота и фосфора из клеток бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa.

Хлорид магния и сульфат калия, входящие в состав среды, усиливают образование пиоцианина — сине-зелёного пигмента, диффундирующего в среду. Это повышает выявляемость Pseudomonas на данной среде. Ионы магния также могут нейтрализовать ЭДТА, если она присутствует в образце.

Желатиновый пептон обеспечивает Pseudomonas необходимыми питательными веществами. Глицерин служит медленно и непрерывно потребляемым источником углерода для растущих клеток.

Для выделения Pseudomonas aeruginosa чашки с агаром с цетримидом следует инокулировать материалом из неселективной среды, например из среды для переваривания казеина соевыми ферментами MH011. При высокой концентрации микроорганизма исследуемый образец можно непосредственно инокулировать на агар с цетримидом.

Колонии Pseudomonas aeruginosa могут иметь зелёную пигментацию, в том числе быть видимыми под ультрафиолетовым светом.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам USP/EP/BP/JP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, приготовленным из 1,36 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-янтарный опалесцирующий гель с небольшим количеством осадка, образующийся в чашках Петри.

Водородный показатель

pH: 7,00–7,40.

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на агаре для переваривания казеина соевыми ферментами.

Стимулирующие рост свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального времени, установленного методикой, при внесении посевной дозы ≤100 КОЕ.

Условия: 30–35 °C, не более 18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестируемого микроорганизма не должен наблюдаться при заданной температуре в течение времени, не меньшего максимального периода, установленного методикой, при внесении посевной дозы ≥100 КОЕ.

Условия: посевная доза не менее 100 КОЕ, 30–35 °C, не менее 72 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на агаре для переваривания казеина соевыми ферментами.