Селективная питательная среда HiMedia MH024-100G Агар с цетримидом — порошкообразный агар для микробиологического анализа, масса упаковки 100 г. HiMedia MH024-100G применяют для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических образцов; хранение сухой среды проводят при 10–30 °C.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических препаратов в соответствии с гармонизированной методикой определения микробиологических пределов. Применяется также для микробиологического контроля нестерильных лекарственных средств.

Состав

Для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Панкреатический перевар желатина

Методика приготовления

1. Взвесьте 45,3 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо в соответствии с валидированным циклом стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар с цетримидом описан King и соавторами. Формула среды соответствует гармонизированной методике USP/EP/BP/JP и используется как селективная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических препаратов.

Цетримид — бромид N-ацетил-N,N,N-триметиламмония — введён в состав среды для подавления роста бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa. Это катионное моющее вещество, действующее как четвертичное аммониевое соединение и вызывающее высвобождение азота и фосфора из клеток бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa.

Хлорид магния и сульфат калия, входящие в состав среды, усиливают образование пиоцианина — сине-зелёного пигмента, диффундирующего в среду. Это облегчает обнаружение Pseudomonas. Ионы магния также могут нейтрализовать ЭДТА (этилендиаминтетрауксусную кислоту), если она присутствует в образце.

Пептонат желатина обеспечивает необходимые питательные вещества для роста Pseudomonas. Глицерин служит медленно и непрерывно высвобождаемым источником углерода для растущих клеток.

Для выделения Pseudomonas aeruginosa чашки с агаром с цетримидом следует инокулировать материалом из неселективной среды, например соево-казеиновой переваренной среды MH011. При высокой концентрации микроорганизма исследуемый образец можно непосредственно инокулировать на агар с цетримидом.

Колонии Pseudomonas aeruginosa могут иметь зелёную пигментацию, в том числе быть заметными под ультрафиолетовым светом. Среда также используется для определения способности микроорганизмов образовывать флуоресцеин и пиоцианин.

Тип образца

• Фармацевтические образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,36%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется опалесцирующий гель светло-янтарного цвета с небольшим количеством осадка.

pH

• pH: 7,00–7,40.

Тест на ростовые свойства

Тест на ростовые свойства проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Ростовые свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ранее полученным на предварительно протестированной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при установленной температуре не позднее минимального времени, указанного для инкубации, при внесении ≤100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестового микроорганизма не должен наблюдаться при установленной температуре в течение не менее максимального времени, указанного для инкубации, при внесении ≥100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C в течение ≥72 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.