Дезоксихолат цитратный агар HiMedia ME065-500G (уп/500 гр)

Питательная агаровая среда Дезоксихолат цитратный агар HiMedia ME065-500G (уп/500 гр) — порошковая среда для микробиологического анализа, рассчитанная на приготовление 1 л среды из 69,02 г сухого препарата. Среда предназначена для селективного выделения кишечных патогенов, включая Salmonella и Shigella, из фармацевтических образцов; для выделения Shigella рекомендуется менее ингибирующая среда.

Назначение

Дезоксихолат цитратный агар HiMedia ME065-500G предназначен для селективного выделения кишечных патогенов в соответствии с требованиями Европейской фармакопеи. Среда применяется для выделения и максимального восстановления микроорганизмов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических образцов.

Среда изготовлена по модифицированной формуле Лейфсона и обозначается как агаровая среда J. В каталоге изделия указано соответствие Европейской фармакопее; сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Тип образца

• Образцы фармацевтической продукции

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

$ Эквивалент мясного экстракта B.

# Эквивалент экстракта говядины.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 69,02 г сухой среды, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Избегайте чрезмерного нагревания, поскольку оно оказывает неблагоприятное воздействие на среду.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Среда рекомендована Европейской фармакопеей 2008 года и обозначается как агаровая среда J. Среда используется для выделения кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых и фармацевтических продуктов. Для выделения Shigella рекомендуется применять менее ингибирующую питательную среду.

Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 ингибирует грамположительные бактерии. Proteus и другие грамположительные организмы также подавляются из-за повышенной концентрации цитратов и солей дезоксихолата в составе среды. Цитратные соли в используемой концентрации ингибируют грамположительные бактерии и большинство других нормальных кишечных микроорганизмов.

Восстановление цитрата железа до сульфида железа вызывает появление колоний с чёрным центром. Shigella формирует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие образования H₂S. Salmonella формирует хорошо развитые бесцветные колонии.

Комбинация пептона HM и пептона HM B обеспечивает поступление азота, минеральных веществ и витаминных факторов, необходимых для усиленного роста. Моногидрат лактозы служит источником сбраживаемых углеводов. Нейтральный красный используется как индикатор: лактозосбраживающие бактерии, включая колиформные бактерии, образуют розовые колонии, а лактозонесбраживающие бактерии — бесцветные колонии.

Кислота, образуемая лактозосбраживающими бактериями, может вызывать осаждение дезоксихолата и формирование зоны осадка вокруг колонии. Среда обеспечивает необходимые факторы роста для нескольких ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды допускает внесение достаточно больших посевных доз без риска перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

Salmonella является одним из основных возбудителей кишечных заболеваний, особенно пищевых токсикоинфекций и брюшного тифа; впервые микроорганизм наблюдался Эбертом в 1880 году. Среда регулярно используется для проверки наличия загрязнения Salmonella в пищевых и фармацевтических продуктах.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текущий порошок светло-жёлтого или розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.

pH

• Значение pH: 7,10–7,50

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста выполняют в соответствии с требованиями Европейской фармакопеи.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принята равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

* Соответствующие номера WDCM.

Обращение с образцами

Сбор и обработка образцов

При обращении с образцами следует применять соответствующие методики согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для подтверждения вида требуется дополнительная биохимическая идентификация.
2. Из-за вариаций питательных потребностей некоторые организмы могут демонстрировать слабый рост.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии.
• Среда гигроскопична; при неправильном хранении возможно образование комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. Утилизацию инфекционных материалов следует выполнять в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать согласно действующим лабораторным методикам.

Отличие от менее селективных сред

Высокая селективность дезоксихолат-цитратного агара позволяет использовать достаточно большие посевные дозы без перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой; при выделении Shigella производитель рекомендует менее ингибирующую среду.