Агаровая питательная среда HiMedia ME065-100G Дезоксихолат-цитратный агар (агаровая среда) — порошковая селективная среда для выделения кишечных патогенов. Применяется для микробиологического контроля фармацевтических образцов; хранение требуется при 10–30 °C, автоклавирование приготовленной среды запрещено.

Назначение

Дезоксихолат-цитратный агар рекомендуется для селективного выделения кишечных патогенов в соответствии с требованиями Европейской фармакопеи (EP). Среда предназначена для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из фармацевтической продукции.

Среда также обозначается как агаровая среда J и приготовлена по модифицированной формуле Лейфсона. Для выделения Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую среду.

Тип образцов

• Фармацевтические образцы

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

$ Эквивалент мясного экстракта.

Эквивалент экстракта мяса B.

Методика приготовления

1. Взвесьте 69,02 г сухой обезвоженной среды — эквивалентную массу на 1 л готовой среды — и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Избегайте чрезмерного нагревания, поскольку он ухудшает свойства среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Дезоксихолат-цитратный агар предназначен для выделения кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella. Среда применяется для контроля наличия контаминации Salmonella в пищевой и фармацевтической продукции в соответствии с EP 2008.

Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 ингибирует грамположительные бактерии. Proteus и другие грамположительные организмы также ингибируются повышенной концентрацией цитратных и дезоксихолатных солей. Цитратная соль в концентрации, предусмотренной рецептурой, подавляет рост грамположительных бактерий и большинства других нормальных кишечных микроорганизмов.

Восстановление цитрата железа до сульфида железа вызывает характерное образование колоний с чёрным центром. Лактозы моногидрат служит источником ферментируемых углеводов. Нейтральный красный выполняет функцию индикатора:

• лактозоферментирующие бактерии, включая колиформные бактерии, образуют розовые колонии;
• лактозонеферментирующие бактерии образуют бесцветные колонии;
• Salmonella образует хорошо развитые бесцветные колонии;
• Shigella образует бесцветные колонии без чёрного центра, что указывает на отсутствие продукции H₂S.

Кислота, образующаяся при ферментации лактозы, может вызывать осаждение дезоксихолата и появление зоны осадка вокруг колонии.

Комбинация пептона HM и пептона HM B обеспечивает азот, минеральные вещества и витаминные факторы, необходимые для усиленного роста. Среда содержит факторы роста, необходимые для ряда ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды позволяет использовать достаточно большие посевные дозы без риска перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: ME065-100G
• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Эквивалентная масса сухой среды: 69,02 г/л
• pH после нагревания: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH готовой среды: 7,10–7,50
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовато-бежевый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.

Испытание на стимуляцию роста

Испытание стимуляции роста проводят в соответствии с требованиями Европейской фармакопеи (EP).

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принята равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновой агаровой среде.

Ключ: * соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и при рекомендованной температуре хранения.

Обращение с образцами и безопасность

При сборе и обращении с образцами соблюдайте соответствующие методики, установленные лабораторными руководствами и регламентами. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предост