Железо-агар с тремя сахарами HiMedia ME021-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Железо-агар с тремя сахарами HiMedia ME021-500G (уп/500 гр) для идентификации и дифференциации грамотрицательных энтеропатогенов. Применяется для анализа ферментации глюкозы, лактозы и сахарозы, а также определения продукции сероводорода (H₂S) в соответствии с Европейской фармакопеей.

Область применения

Среда используется для идентификации и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae на основании их способности ферментировать три вида сахаров и вырабатывать сероводород. Рекомендуется для использования в микробиологических лабораториях при проведении тестов на микробиологическую чистоту и идентификации патогенов.

Принцип измерения и интерпретация

Железо-агар с тремя сахарами (TSI) основан на способности бактерий расщеплять углеводы и восстанавливать тиосульфат натрия.

Механизм работы

• Питательные компоненты: пептоны (казеиновый и говяжий), экстракт дрожжей и говяжий экстракт обеспечивают азотистые соединения, серу, микроэлементы и витамины группы B.
• Осмотический баланс: поддерживается хлоридом натрия.
• Углеводы: лактоза, сахароза и глюкоза являются ферментируемыми субстратами.
• Индикация H₂S: система из тиосульфата натрия и ионов железа позволяет обнаружить сероводород. Тиосульфат натрия также инактивирует галогены, снижая их токсичность в пробе.
• Индикатор pH: феноловый красный.

Интерпретация результатов

1. Ферментация глюкозы: организмы, расщепляющие глюкозу, вырабатывают кислоты, что меняет цвет среды с красного на жёлтый. В столбике (анаэробная зона) образуется больше кислоты, чем в скосе (аэробная зона).
2. Дифференциация сахаров:
   • Щелочной скос (красный) / кислый столбик (жёлтый): ферментируется только глюкоза.
   • Кислый скос (жёлтый) / кислый столбик (жёлтый): ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара.
3. Продукция газа (CO₂): определяется по наличию пузырьков или трещин в агаре.
4. Продукция H₂S: тиосульфат восстанавливается до сероводорода, который вступает в реакцию с солями железа, образуя нерастворимый чёрный осадок сульфида железа (обычно в столбике).

Примечание: Некоторые виды Salmonella могут не давать положительной реакции на H₂S на среде TSI, в то время как на агаре Клиглера реакция может быть положительной. Это связано с тем, что утилизация сахарозы в TSI может подавлять ферментативный путь продукции H₂S.

Для точного разграничения видов Salmonella и Proteus рекомендуется использовать TSI-агар параллельно с мочевинным агаром или бульоном (M112/M111).

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 64,03 г сухой среды (эквивалент одного литра) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут или согласно валидированному циклу.
5. Охладите и залейте среду в виде скоса с длиной столбика около 25 мм (1 дюйм).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель розово-красного цвета.
• Реакция: pH 7,4 $\pm$ 0,2 для 6,4% (масс./об.) водного раствора после стерилизации.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Сухая среда: хранить в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Готовая среда: хранить при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.