Дифференциальный агар с бриллиантовым зеленым HiMedia ME016-500G (уп/500 гр)

Питательная дифференциальная среда «Дифференциальный агар с бриллиантовым зеленым HiMedia ME016-500G (уп/500 гр)» предназначена для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из пищевых и молочных продуктов в соответствии с Европейской фармакопеей. Среда применяется для первичного посева пищевых, фармацевтических и клинических образцов; ограничение метода — Salmonella Typhi и Shigella spp. могут не расти, а Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены мелкими красными колониями.

Назначение и область применения

Дифференциальный агар с бриллиантовым зеленым, феноловым красным, моногидратом лактозы и сахарозой используется для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из пищевых продуктов, молочных продуктов и фармацевтических образцов.

Среда предназначена для:

• первичного посева при выделении видов Salmonella;
• анализа пищевых и молочных проб;
• контроля фармацевтических образцов;
• исследований клинического материала;
• работы с обсеменёнными образцами и большими посевными дозами.

Состав среды соответствует Европейской фармакопее и обозначается как агаровая среда L.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности. Пептон HMC эквивалентен пептонам мясного и казеинового происхождения.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Масса упаковки: 500 г
• Артикул: ME016-500G
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Реакция среды после стерилизации: pH 6,9 ± 0,2 для водного раствора с концентрацией 5,8 % масс./об.
• Диапазон pH по контролю качества: 6,70–7,10

Принцип действия и интерпретация

Компоненты среды подобраны для селективного выделения сальмонелл и дифференциации микроорганизмов по способности ферментировать лактозу и сахарозу.

• Пептон HMC и дрожжевой экстракт поставляют незаменимые аминокислоты и длинноцепочечные пептиды, необходимые для роста микроорганизмов.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.
• Моногидрат лактозы и сахароза являются ферментируемыми источниками углеводов.
• Феноловый красный служит кислотно-основным индикатором: бактерии, ферментирующие лактозу и/или сахарозу, вызывают жёлтое окрашивание.
• Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий.

Среда применяется как первичная агаровая среда для выделения видов Salmonella. Первоначально среда была описана как средство дифференциации паратифозной группы B от других грамотрицательных кишечных бактерий, а затем модифицирована для выделения Salmonella из образцов кала.

Из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей питательной средой для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов. Культуры, обогащённые в селенитовом или тетратионатном бульоне, часто высевают параллельно на агар с бриллиантовым зелёным, агар сульфита висмута, SS-агар и агар МакКонки.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют белые или розовато-красные колонии после инкубации в течение 18–24 ч.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 57,59 г сухой среды, что соответствует количеству обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам и обращению

Типы образцов

• Пищевые продукты и молочные образцы.
• Фармацевтические образцы.
• Клинические образцы.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим указаниям. Для фармацевтических образцов используйте процедуры отбора и обработки проб в соответствии с применимыми руководствами и локальными нормативными требованиями.

После использования заражённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода и мешающие факторы

• Salmonella Typhi и Shigella spp. могут не расти на этой среде.
• Proteus, Pseudomonas и Citrobacter spp. могут имитировать кишечные патогены, формируя мелкие красные колонии.
• Для повышения вероятности восстановления целевых микроорганизмов рекомендуется выполнять параллельный посев на менее ингибирующую среду.
• Цвет колоний не является самостоятельным подтверждением видовой принадлежности микроорганизма и требует дальнейшей идентификации.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: зеленовато-коричневый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: после стерилизации реакция 5,8 % водного раствора; pH 6,9 ± 0,2.
• pH: 6,70–7,10.

Тест на ростовые свойства

Ростовые свойства оценивают в соответствии с Европейской фармакопеей после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.