HiMedia ME016-100G Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым

Питательная микробиологическая среда HiMedia ME016-100G «Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым» представляет собой селективный порошкообразный агар для выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из пищевых и молочных продуктов. Среда применяется для первичного посева образцов и содержит бриллиантовый зелёный, феноловый красный, лактозы моногидрат и сахарозу; Salmonella Typhi и некоторые сопутствующие микроорганизмы могут не расти либо образовывать колонии, имитирующие кишечные патогены.

Назначение и область применения

Модифицированный агар с бриллиантовым зелёным, феноловым красным, лактозы моногидратом и сахарозой применяют для селективного выделения сальмонелл, за исключением Salmonella Typhi, из пищевых продуктов, молочных и фармацевтических образцов.

Среда предназначена для:

• первичного посева при выделении видов Salmonella;
• анализа пищевых и молочных образцов;
• анализа фармацевтических образцов;
• исследования клинических образцов;
• работы с обогащёнными культурами, полученными в селенитном или тетратионатном бульоне.

Состав среды соответствует требованиям Европейской фармакопеи и обозначается как агаровая среда L. Среду также применяют для пищевых и клинических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

~ Пептон HMC эквивалентен пептонам животного и казеинового происхождения.

Принцип действия и интерпретация

Пептон HMC и дрожжевой экстракт поставляют необходимые аминокислоты и длинноцепочечные пептиды, способствующие росту микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Лактозы моногидрат и сахароза являются сбраживаемыми источниками углеводов.

Феноловый красный служит кислотно-основным индикатором: бактерии, сбраживающие лактозу и/или сахарозу, вызывают появление жёлтой окраски. Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий.

В среде в основном подавляется рост следующих микроорганизмов:

• Salmonella Typhi;
• виды Shigella;
• Escherichia coli;
• виды Proteus;
• виды Pseudomonas;
• Staphylococcus aureus.

Высокая селективность среды позволяет анализировать образцы с большим количеством посевного материала и сильно загрязнённые образцы. Для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов рекомендуется использовать среду совместно с менее ингибирующей питательной средой.

Обогащённые в селенитном или тетратионатном бульоне культуры часто высевают одновременно на агар с бриллиантовым зелёным, бисмут-сульфитный агар, агар SS и агар МакКонки.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют белые или розовато-красные колонии после инкубации в течение 18–24 ч. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде. Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,59 г сухой среды, что соответствует количеству обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин, либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Фармацевтические образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.

При работе с образцами и культурами:

• используйте защитные перчатки;
• надевайте защитную одежду;
• используйте средства защиты глаз;
• используйте средства защиты лица;
• соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории;
• соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с образцами и культурами;
• руководствуйтесь указаниями по безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

• Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
• Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.
• Из-за высокой селективности для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов среду рекомендуется применять совместно с менее ингибирующей средой.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении по инструкции на этикетке, использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.
• Реакция: после стерилизации реакция 5,8 % массо-объёмного водного раствора.
• pH: 6,70–7,10.
• pH после стерилизации при 25 °C: 6,9 ± 0,2.

Тест на стимуляцию роста

Стимуляцию роста оценивают в соответствии с Европейской фармакопеей после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.

Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности среды. Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/