HiMedia MCD972-500G Желчно-эскулиновый HiCynth агар

Дифференциальная питательная среда HiMedia MCD972-500G Желчно-эскулиновый HiCynth™ агар производства HiMedia предназначена для выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов. Среда содержит химически определённые пептоны и выявляет гидролиз эскулина по образованию тёмно-коричневого или чёрного осадка вокруг колоний.

Назначение

Желчно-эскулиновый HiCynth™ агар применяют для:

• выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D;
• анализа пищевых продуктов;
• анализа фармацевтических препаратов;
• дифференциации стрептококков группы D и стрептококков, не относящихся к группе D;
• дифференциации представителей семейств Enterobacteriaceae, включая Klebsiella, Enterobacter и Serratia, от других родов Enterobacteriaceae по способности гидролизовать эскулин.

Для идентификации энтерококков следует дополнительно выполнять другие тесты, включая определение устойчивости к соли.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

* Пептоны с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки группы D содержат антиген липотейхоевой кислоты группы D в клеточной стенке. Представители бывшей группы D, являющиеся обычными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, обозначаются как фекальные стрептококки или энтерококки.

Уникальная способность Enterococci расщеплять эскулин используется в дифференциальной диагностике. Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричнево-чёрного осадка.

Эскулин-гидролиз применяют для идентификации Enterococci. Желчно-эскулиновый агар был разработан для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда также позволяет отличать стрептококки группы D от стрептококков, не относящихся к группе D.

Эскулин в составе среды гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, который визуализируется в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

При разливе среды в пробирки с формированием скошенной поверхности положительную реакцию регистрируют при почернении более половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч. При полном отсутствии почернения либо при почернении менее половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч реакцию считают отрицательной.

Некоторые Viridans Streptococci могут давать слабоположительную реакцию. Положительный желчно-эскулиновый тест также могут давать виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека.

Среда содержит пептоны HiCynth™ № 1 и HiCynth™ № 5 как источники углерода, азота, аминокислот, витаминов и необходимых питательных веществ для роста. Синтетическое моющее средство № II подавляет большинство сопутствующих бактерий.

Пептоны животного или растительного происхождения полностью заменены химически определёнными пептонами. Такая рецептура исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE), характерные для пептонов животного происхождения.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 64,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Ориентировочное давление составляет ≈0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
7. В качестве альтернативы среду можно разлить в пробирки для формирования скошенной поверхности.

Подготовка посевного материала и инокуляция

1. Инокулируйте исследуемую пробу в бульон Тодда—Хьюитта (M313).
2. Инкубируйте культуру в течение 24 ч.
3. Внесите две капли культуры на поверхность скошенной среды или на поверхность среды в чашке.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри или пробирках в виде скошенной поверхности образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета с голубоватым оттенком.
• Реакция: реакция 6,5% водного раствора по массе при 25 °C.
• pH по данным контроля качества: 6,40–6,80.
• pH по составу среды при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.