HiMedia MCD962-500G R-2A HiCynth агар

Агар HiMedia MCD962-500G R-2A HiCynth агар — сухая питательная среда для определения гетеротрофного числа микроорганизмов в пробах воды при длительной инкубации. HiMedia MCD962-500G R-2A HiCynth агар применяется для посевного подсчёта бактерий в воде; масса упаковки составляет 500 г, температура хранения — ниже 30 °C.

Назначение

R-2A HiCynth агар используется для определения гетеротрофного числа микроорганизмов (HPC) в пробах воды с применением увеличенного периода инкубации.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эксплуатационных характеристик.

* Пептоны с химически определённым составом.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Гетеротрофное число микроорганизмов (HPC), ранее называвшееся стандартным числом микроорганизмов, представляет собой метод оценки количества живых гетеротрофных бактерий в воде и контроля изменений их количества при водоподготовке, в распределительных системах или плавательных бассейнах.

R-2A агар применяется для определения гетеротрофного числа микроорганизмов методами заливки, поверхностного посева или мембранной фильтрации. Среда R-2A разработана по рецептуре Reasoner и Geldreich.

Микроорганизмы, подвергшиеся стрессу или повреждению в процессе водоподготовки, не способны эффективно расти на средах с высоким содержанием питательных веществ, поскольку быстрорастущие организмы подавляют их рост. Поэтому применение малопитательной среды R-2A с увеличенным периодом инкубации позволяет обеспечить рост стрессированных микроорганизмов.

R-2A HiCynth агар является модификацией среды R-2A, в которой животные пептоны заменены пептонами с химически определённым составом для исключения риска BSE/TSE — губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивных губчатых энцефалопатий.

Многие бактерии из природной воды, содержащей ограниченное количество питательных веществ при температуре окружающей среды, лучше растут на средах с пониженным содержанием питательных компонентов. Оптимальный рост таких бактерий происходит при температурах ниже стандартной лабораторной температуры инкубации 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• Пептоны HiCynth™ № 3 и № 5 обеспечивают поступление азота, углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и минеральных веществ.
• Декстроза служит источником энергии.
• Растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов, поглощая токсичные побочные продукты метаболизма.
• Пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток.
• Сульфат магния служит источником двухвалентных катионов и сульфата.
• Дикалий фосфат используется для стабилизации pH среды.

Количество колоний на чашке выражают в КОЕ (колониеобразующих единицах) на объём исследуемой пробы.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 18,12 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не перегревайте среду.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 1,81 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• pH раствора: 7,20 ± 0,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч.

Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется продлить инкубацию до 7 суток для подтверждения отсутствия микроорганизмов.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.

Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Методики применения

R-2A HiCynth агар предназначен для определения гетеротрофного числа микроорганизмов в воде методами:

• заливки;
• поверхностного посева;
• мембранной фильтрации.

Среда применяется при анализе воды в процессе водоподготовки, при контроле распределительных систем и в плавательных бассейнах. Отличие R-2A HiCynth агара от стандартной среды R-2A заключается в замене животных пептонов на пептоны с химически определённым составом.