HiMedia MCD962-100G R-2A HiCynth агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MCD962-100G R-2A HiCynth агар — сухой порошок с химически определёнными пептонами для микробиологического анализа. Среда предназначена для количественного определения гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды методом посева на чашки с использованием длительной инкубации.

Назначение

R-2A HiCynth агар применяют для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды при увеличенной продолжительности инкубации. Метод позволяет оценивать количество живых гетеротрофных бактерий и отслеживать изменения их содержания при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

* Пептоны с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация результатов

Общее количество гетеротрофных микроорганизмов, ранее обозначавшееся как стандартное количество микроорганизмов на чашке, представляет собой процедуру оценки числа живых гетеротрофных бактерий в воде. Показатель также используют для контроля изменений микробной нагрузки при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах.

R-2A агар рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов методами заливного посева, поверхностного посева или мембранной фильтрации. Среда R-2A приготовлена в соответствии с рецептурой Reasoner и Geldreich.

Микроорганизмы, подвергшиеся стрессу или повреждению в процессе водоподготовки, могут не расти на высокопитательных средах, поскольку быстрорастущие организмы подавляют их рост. Использование малопитательной среды R-2A с увеличенным периодом инкубации создаёт условия для восстановления и роста стрессированных микроорганизмов.

R-2A HiCynth агар является модификацией среды R-2A, в которой животные пептоны заменены пептонами с химически определённым составом для исключения риска, связанного с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатией (BSE/TSE).

Многие бактерии из природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с пониженным содержанием питательных компонентов и при температурах ниже стандартной лабораторной температуры инкубации 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• Пептоны HiCynth № 3 и HiCynth № 5 обеспечивают источники азота, углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и минеральных веществ.
• Декстроза служит источником энергии.
• Растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов за счёт связывания токсичных продуктов метаболизма.
• Пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток.
• Сульфат магния служит источником двухвалентных катионов и сульфата.
• Дикалийфосфат используется для стабилизации pH среды.

Количество колоний на чашке выражают в КОЕ — колониеобразующих единицах — на объём исследуемой пробы.

Методики посева

Среду R-2A можно применять в следующих вариантах:

• заливной посев;
• поверхностный посев;
• мембранная фильтрация.

Приготовление среды и процедура анализа

1. Взвесьте 18,12 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм — приблизительно 0,103 МПа — при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется увеличивать продолжительность инкубации до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета, образующийся в чашках Петри.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 1,81 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• Реакция водного раствора по pH: 7,20 ± 0,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется дополнительная инкубация продолжительностью до 7 суток для подтверждения отсутствия микроорганизмов.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухую среду в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.