HiMedia MCD870-100G TCBS HiCynth агар (селективный)

Селективный агар HiMedia MCD870-100G TCBS HiCynth агар (селективный) — сухая питательная среда на основе химически определённых пептонов. Применяется для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов; приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов из пищевых продуктов и проб воды.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

* Пептоны с химически определённым составом.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 89,08 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозный агар (TCBS-агар) был разработан Kobayashi и соавторами на основе селективной среды Nakanishi. Среда первоначально предназначалась для выделения V. cholerae и V. parahaemolyticus, однако большинство вибрионов формирует на ней крупные полноценные колонии различной морфологии.

Обогащение в щелочной пептонной воде или щелочной пептонной воде HiCynth™ (M618/MCD618) с последующим выделением на TCBS-агаре является стандартной процедурой выделения V. cholerae. В TCBS HiCynth™ агар животные и растительные пептоны заменены пептонами с химически определённым составом, что позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерных для животных пептонов.

Пептоны HiCynth™ № 3 и HiCynth™ № 5 обеспечивают среду азотистыми соединениями, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Синтетическое моющее вещество и цитрат натрия подавляют грамположительные бактерии и колиформные микроорганизмы. Тиосульфат натрия служит источником серы, которая в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода H₂S.

Для метаболизма вибрионов в состав среды внесена сбраживаемая углеводная субстанция — сахароза. Вибрионы, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии. Бромтимоловый синий и тимоловый синий используются как индикаторы pH. Щелочная реакция среды улучшает выделение V. cholerae.

Штаммы V. cholerae образуют на TCBS HiCynth™ агар жёлтые колонии вследствие сбраживания сахарозы. V. alginolyticus также образует жёлтые колонии. V. parahaemolyticus не сбраживает сахарозу и поэтому формирует сине-зелёные колонии, как и V. vulnificus. Сбраживающие сахарозу виды Proteus могут формировать жёлтые колонии.

TCBS HiCynth™ агар пригоден для оксидазного тестирования видов Vibrio. Некоторые штаммы V. cholerae могут иметь зелёные или бесцветные колонии на TCBS HiCynth™ агар вследствие замедленного сбраживания сахарозы. Среда обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio, однако отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут формировать на TCBS-агаре сине-зелёные колонии. Любая колония на TCBS-агаре, не образующая H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio.

Образцы фекалий следует наносить на среду в большом количестве, поскольку рост некоторых видов может подавляться из-за сбраживания сахарозы и накопления кислот.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среду следует инокулировать большим количеством фекального материала, поскольку рост некоторых видов может подавляться из-за сбраживания сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут формировать на TCBS-агаре сине-зелёные колонии.
3. Сбраживающие сахарозу виды Proteus могут формировать жёлтые колонии.
4. В исходных данных приведены взаимно различающиеся указания относительно оксидазного тестирования: в разделе принципа действия TCBS HiCynth™ агар назван пригодным для оксидазного тестирования видов Vibrio, тогда как в разделе ограничений указано, что TCBS-агар для этой цели непригоден.
5. Некоторые штаммы V. cholerae могут иметь зелёные или бесцветные колонии вследствие замедленного сбраживания сахарозы.
6. TCBS-агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любая колония, не образующая H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-коричневый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция 8,9%-ного водного раствора при 25 °C: pH 8,8 ± 0,2.