HiMedia MCD868-100G Железо-сульфитный HiCynth агар

Железо-сульфитный HiCynth агар HiMedia MCD868-100G для обнаружения термофильных анаэробных организмов, вызывающих сульфидную порчу пищевых продуктов. Среда содержит химически определенный пептон HiCynth™ для исключения риска заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию сульфитного агара Кэмерона. Большинство клостридий обладают сульфитредуктазой в цитоплазме, но не способны выводить её наружу. При восстановлении сульфита до H₂S в присутствии цитрата железа образуется осадок сульфида железа, что приводит к окрашиванию колоний в чёрный цвет.

Использование химически определенного пептона HiCynth™ No.3 обеспечивает бактерии необходимыми соединениями азота, углерода, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими питательными веществами.

Методика проведения анализа

Для обнаружения организмов, вызывающих сульфидную порчу, применяются два метода:

Метод глубокого посева с перемешиванием (Deep-Shake Culture Method)

1. Разлейте среду в пробирки по 10 мл.
2. Внесите пробу в среду, когда её температура составляет около 50 °C.
3. Дайте среде застыть и инкубируйте при 55 °C в течение 24–48 часов.
4. Результат: типичные термофильные виды, такие как Desulfotomaculum nigrificans, образуют отчетливые чёрные сферические колонии в толще среды.

Метод Аттенборо и Скарра (Attenborough and Scarr Method)

1. Разбавленные пробы сахара или других пищевых продуктов фильтруют через мембранные фильтры.
2. Фильтры сворачивают в трубочку и помещают в пробирки с небольшим количеством железо-сульфитного HiCynth агара (при температуре 50 °C), достаточным для их покрытия.
3. После застывания среды инкубируют при 55–56 °C в течение 24–48 часов.
4. Подсчитывают количество чёрных колоний на мембранном фильтре.

Важное примечание: Почернение является лишь предварительным доказательством роста клостридий; для окончательной идентификации необходимо проведение подтверждающих тестов. Некоторые грамотрицательные бактерии также способны восстанавливать сульфит, однако в этих случаях ферменты являются внеклеточными, из-за чего темнеет вся среда, что делает подсчёт колоний невозможным.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 26 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Физико-химические свойства

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до коричнево-желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый, слегка опалесцирующий гель.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• pH (2,6 % водный раствор при 25 °C): 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики определены в анаэробных условиях после инкубации при 55–56 °C в течение 24–48 часов.

Состав, г/л

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, при неправильном хранении возможно образование комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.