HiMedia MCD834-500G Основа кровяного HiCynth агара №2

Питательная среда HiMedia MCD834-500G Основа кровяного HiCynth агара №2 производства HiMedia — сухая химически определённая основа для приготовления кровяного агара. Применяется для выделения стрептококков, пневмококков и других требовательных патогенных микроорганизмов с оценкой гемолиза; среда не поддерживает рост H. haemolyticus.

Назначение

Основа предназначена для приготовления кровяного агара, обеспечивающего выделение стрептококков, пневмококков и других требовательных патогенных микроорганизмов без подавления их гемолитических реакций.

Среда может использоваться:

• для дифференциации видов Brucella и Campylobacter при добавлении соответствующих селективных антибиотических добавок;
• для приготовления шоколадного агара при выделении видов Haemophilus и Neisseria;
• для первичного выделения видов Haemophilus с использованием лошадиной крови для обогащения;
• для микробиологического анализа пищевых образцов.

Состав

Химически определённые пептоны HiCynth™ No.3 и HiCynth™ No.5 являются источниками углерода, витаминов, азота и аминокислот. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Агар формирует гелевую основу среды.

* Химически определённые пептоны.

** Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Требовательный микроорганизм характеризуется полным набором пищевых потребностей и нуждается в дополнительных молекулах — структурных компонентах клетки для поддержания жизнедеятельности.

Основа кровяного HiCynth агара №2 представляет собой высокопитательную среду, в которой животные пептоны традиционной основы кровяного агара заменены химически определёнными пептонами. Такая замена исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерные для животных пептонов.

Микроорганизмы, продуцирующие гемолизин, образуют на среде видимые зоны гемолиза. Среда также служит дифференциальной средой для видов Brucella и Campylobacter при добавлении различных антибиотических добавок для соответствующих бактерий.

Культуры Brucella обладают высокой инфекционностью и требуют осторожного обращения. Предпочтительно проводить инкубацию в атмосфере, содержащей 5–10 % диоксида углерода (CO₂).

Сравнительные исследования с использованием крови лошади, кролика и овцы показали, что овечья кровь обеспечивает наиболее чёткие и воспроизводимые характеристики колоний и гемолиза после 24 и 48 ч инкубации.

Добавление крови в концентрации 5–10 % обеспечивает дополнительные факторы роста и создаёт основу для определения гемолитических реакций. Характер гемолиза может изменяться в зависимости от источника животной крови и типа используемой основы.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию 21,25 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (15 psi; приблизительно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите расплавленную основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильную дефибринированную кровь в количестве 7 % об./об.
6. Для приготовления селективной среды тщательно перемешайте состав и разлейте его в стерильные чашки Петри.

Добавки для отдельных микроорганизмов

• Виды Brucella: добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Виды Campylobacter: добавьте восстановленное содержимое одного флакона одной из следующих добавок к 500 мл стерильной расплавленной основы:
  • селективная добавка Blaser–Wang (FD006);
  • селективная добавка Butzler (FD007);
  • селективная добавка Skirrow (FD008);
  • добавка для стимуляции роста минералов (FD009).
• Виды Streptococcus: добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NNP (FD031) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Применение для приготовления шоколадного агара

Среда может использоваться для приготовления шоколадного агара при выделении видов Haemophilus и Neisseria.

Для первичного выделения видов Haemophilus применяется лошадиная кровь для обогащения. Для получения лучших результатов половину чашки с лошадиным кровяным агаром обрабатывают двумя каплями 10%-ного сапонина.

Тип образца

• Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако получаемая реакция может быть похожа на β-гемолитические стрептококки и требует подтверждения. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.
3. Для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические или серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления стерильной дефибринированной крови в количестве 5 % об./об.: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,0%-ного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого препарата: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить препарат в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Требование к месту хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Препарат обладает гигроскопичностью. При неправильном хранении возможно образование комков. Рабочие характеристики препарата сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера