HiMedia MCD834-100G Основа кровяного HiCynth агара №2

Порошковая основа питательной среды HiMedia MCD834-100G Основа кровяного HiCynth агара №2 с химически определёнными пептонами HiCynth™. Предназначена для выделения стрептококков, пневмококков и других требовательных патогенных микроорганизмов с сохранением возможности оценки гемолитических реакций.

Назначение

Среда разработана для максимального восстановления стрептококков, пневмококков и других требовательных патогенных микроорганизмов без влияния на их гемолитические реакции.

Тип продукта: HiCynth™
Физическая форма: порошок
Назначение: основа кровяного агара
Фасовка: 100 г
Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
Тип образца: пищевые продукты

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

* Пептоны с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация результатов

Требовательный микроорганизм характеризуется полным набором пищевых потребностей и нуждается в дополнительных молекулах — структурных компонентах клетки, необходимых для выживания.

Кровяной HiCynth агар — основа №2 представляет собой высокопитательную среду, в которой животные пептоны традиционной основы кровяного агара заменены пептонами с химически определённым составом. Это позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерных для использования пептонов животного происхождения.

Микроорганизмы, продуцирующие гемолизин, формируют на среде видимые зоны гемолиза. Среда также служит дифференциальной средой для видов Brucella и Campylobacter при добавлении различных антибиотических добавок, предназначенных для соответствующих бактерий.

Культуры Brucella обладают высокой инфекционностью и требуют осторожного обращения. Предпочтительна инкубация в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа.

В сравнительных исследованиях лошадиной, кроличьей и овечьей крови овечья кровь обеспечивала наиболее чёткие и воспроизводимые характеристики колоний и гемолиза после 24 и 48 ч инкубации.

Среду можно использовать для приготовления шоколадного агара для выделения видов Haemophilus и Neisseria. Среда также применяется для первичного выделения видов Haemophilus, при этом лошадиная кровь используется для обогащения. Для получения лучших результатов половину чашки с лошадиным кровяным агаром рекомендуется покрыть двумя каплями 10%-го сапонина.

Пептоны HiCynth™ №3 и HiCynth™ №5 служат источниками необходимых углеродных, витаминных, азотистых и аминокислотных компонентов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление крови в концентрации 5–10 % обеспечивает дополнительные факторы роста и служит основой для определения гемолитических реакций. Характер гемолиза может изменяться в зависимости от источника животной крови и типа используемой базовой среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 21,25 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите расплавленную основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Для видов Brucella добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
7. Для видов Campylobacter добавьте к 500 мл стерильной расплавленной основы восстановленное содержимое одного флакона одной из следующих добавок:
   • селективная добавка Blaser–Wang (FD006);
   • селективная добавка Butzler (FD007);
   • селективная добавка Skirrow (FD008);
   • добавка для роста с минералами (FD009).
8. Для видов Streptococcus добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NNP (FD031) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
9. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Желирование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5%-го агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,0%-го масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после добавления 5 % масс./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к базовой среде поддерживает рост H. haemolyticus, однако получаемая реакция может быть похожа на β-гемолитические стрептококки и требует подтверждения. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.
3. Для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические или серологические исследования.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование: Основа кровяного HiCynth агара №2
• Артикул: MCD834-100G
• Назначение изделия: основа
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: химически определённое, HiCynth™
• Тип продукта: HiCynth™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Температура хранения сух