HiMedia MCD833-500G Основа HiCynth агара для Bacillus cereus

Питательная среда HiMedia MCD833-500G Основа HiCynth агара для Bacillus cereus — порошковая химически определённая основа селективной среды. Применяется для выделения, обнаружения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых образцах; типичная идентификация ограничена тем, что на этой среде Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis.

Назначение

Основа агара HiCynth для Bacillus cereus используется как селективная питательная среда для выделения, обнаружения и количественного определения Bacillus cereus из пищевых образцов.

Состав

Количество компонентов указано в г/л.

* Пептон с химически определённым составом.
Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Пищевое отравление, вызываемое Bacillus cereus, связано с употреблением контаминированного риса. Микроорганизм также может вызывать инфекции глаз и ряд других клинических состояний, включая образование абсцессов, менингит, септицемию и инфицирование ран. В ветеринарной практике Bacillus cereus является известной причиной мастита, особенно у овец и тёлок.

Среда Bacillus Cereus Agar была разработана для выделения и количественного определения Bacillus cereus из пищевых продуктов. HiCynth™ Agar является модификацией Bacillus Cereus Agar: пептоны животного происхождения заменены пептонами с химически определённым составом для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

Среда поддерживает рост даже небольшого количества клеток и спор Bacillus cereus в присутствии большого количества других загрязняющих микроорганизмов пищевых продуктов. Типичные колонии Bacillus cereus имеют выемчатые края, диаметр около 5 мм и характерную окраску от бирюзовой до павлинье-синей; вокруг колоний формируется выраженный осадок яичного желтка такого же цвета. Бактерии не ферментируют маннитол, поэтому вокруг колоний не происходит изменения цвета индикаторного красителя.

Добавление сульфата полимиксина B до конечной концентрации 100 ЕД/мл среды обеспечивает селективность при выделении Bacillus cereus и подавляет рост сопутствующей бактериальной флоры. Если в посевном материале предполагается наличие плесневых грибов, для подавления плесневой контаминации можно добавить фильтр-стерилизованный циклогексимид в конечной концентрации 40 мкг/мл.

Некоторые штаммы Bacillus cereus дают очень слабую реакцию на яичный желток. Кроме того, на этой среде Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis.

Пептон HiCynth™ № 2 служит источником азота и углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других факторов роста. Пируват натрия улучшает образование осадка яичного желтка и усиливает спорообразование. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH для выявления ферментации маннитола.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 20,5 г сухой основы в 475 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление — приблизительно 0,103 МПа (15 psi).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки с полимиксином B FD003.
6. Добавьте 25 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика выделения и количественного определения

1. Гомогенизированный образец разведите в пептонной воде M028.
2. Нанесите 0,1 мл разведённого образца на поверхность приготовленной среды.
3. Инкубируйте при 37 °C в аэробных условиях в течение 24–48 ч.
4. Для существенного снижения роста контаминирующей микрофлоры используйте инкубацию в течение 24 ч.
5. Представьте результат как количество колоний Bacillus cereus на 1 г пищевого образца.
6. До интерпретации результатов проведите подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется непрозрачный гель желтовато-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,1%-ного водного раствора базовой среды при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки с полимиксином B FD003 и эмульсии яичного желтка FD045, после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

• Тип изделия: основа питательной среды.
• Торговая система среды: HiCynth™.
• Происхождение пептона: химически определённый состав (HiCynth™).
• Физическая форма: порошок.
• Масса: 500 г.
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Температура хранения сухой основы: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Температурный диапазон: 10–30 °C.
• Конечный pH: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7