HiMedia MCD833-100G Основа HiCynth агара для Bacillus cereus

Селективная питательная среда HiMedia MCD833-100G Основа HiCynth агара для Bacillus cereus производства HiMedia предназначена для выделения, обнаружения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых образцах. Среда поддерживает рост небольшого количества клеток и спор Bacillus cereus на фоне сопутствующей микрофлоры, но не позволяет отличить Bacillus cereus от Bacillus thuringiensis без подтверждающих тестов.

Назначение

HiMedia MCD833-100G применяется как селективная питательная среда для выделения, обнаружения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах.

Основа HiCynth агара для Bacillus cereus представляет собой модификацию агара для Bacillus cereus, в которой пептоны животного происхождения заменены химически определёнными пептонами. Такая замена предназначена для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Состав

Состав на 1 л среды:

* Пептон с химически определённым составом.
** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,5 г порошка в 475 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки с полимиксином B (FD003) и 25 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Пищевые отравления, вызываемые Bacillus cereus, могут быть связаны с употреблением контаминированного риса. Микроорганизм также вызывает глазные инфекции и ряд других клинических состояний, включая образование абсцессов, менингит, септицемию и инфицирование ран. В ветеринарной практике Bacillus cereus является известной причиной мастита, особенно у овец и нетелей.

Агар для Bacillus cereus был разработан для селективного выделения и количественного определения Bacillus cereus из пищевых продуктов. Основа HiCynth агара для Bacillus cereus поддерживает рост даже небольшого количества клеток и спор Bacillus cereus в присутствии большого количества других пищевых контаминантов.

Типичные колонии Bacillus cereus имеют следующие признаки:

• зубчатые края;
• диаметр около 5 мм;
• характерная окраска от бирюзовой до павлинье-синей;
• выраженная зона преципитации яичного желтка того же цвета.

Bacillus cereus не ферментирует маннитол, поэтому вокруг колоний отсутствует изменение цвета индикаторного красителя.

Добавление сульфата полимиксина B до конечной концентрации 100 ЕД/мл среды обеспечивает селективность среды для выделения Bacillus cereus и подавляет рост сопутствующей бактериальной флоры. При подозрении на наличие плесневых грибов в посевном материале в среду можно добавить фильтр-стерилизованный циклогексимид в концентрации 40 мкг/мл для подавления плесневой контаминации.

Некоторые штаммы Bacillus cereus дают очень слабую реакцию на яичный желток. На этой среде Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis, поэтому перед интерпретацией результатов необходимо провести подтверждающие тесты.

Пептон HiCynth™ № 2 обеспечивает среду источниками азота и углерода, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими факторами роста. Пируват натрия улучшает преципитацию яичного желтка и усиливает спорообразование. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH для выявления ферментации маннитола.

Техническое отличие от исходного агара для Bacillus cereus: в основе HiCynth используются химически определённые пептоны вместо пептонов животного происхождения.

Методика выделения и количественного определения

Для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах рекомендуется следующая методика:

1. Гомогенизируйте исследуемый образец.
2. Разведите образец в пептонной воде (M028).
3. Нанесите 0,1 мл разведённого гомогенизированного образца на поверхность приготовленной среды.
4. Инкубируйте при 37 °C в аэробных условиях в течение 24–48 ч.
5. Для существенного снижения возможного роста контаминирующей микрофлоры используйте инкубацию в течение 24 ч.
6. Рассчитайте и представьте результат как количество колоний Bacillus cereus на 1 г пищевого образца.
7. До интерпретации результата выполните подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется непрозрачный гель желтовато-зелёного цвета.

Реакция

Реакция 4,1%-ного водного раствора базовой среды при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки с полимиксином B (FD003) и эмульсии яичного желтка (FD045), после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Масса: 100 г.
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.