HiMedia MCD616-100G Основа Tergitol-7 HiCynth агара

Питательная среда HiMedia MCD616-100G Основа Tergitol-7 HiCynth агара — порошковая основа с химически определёнными пептонами HiCynth™. Среда предназначена для селективного и дифференциального выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов в воде и пищевых продуктах; рабочий диапазон pH составляет 6,70–7,10.

Назначение и область применения

Основа Tergitol-7 HiCynth агара применяется для приготовления селективной и дифференциальной питательной среды при выявлении и количественном определении колиформных микроорганизмов.

Среда используется:

• для рутинного анализа воды;
• для исследования пищевых продуктов;
• для определения общих колиформ при инкубации при 37 °C;
• для определения фекальных колиформ при инкубации при 44 °C.

Модификация Tergitol-7 HiCynth агара содержит химически определённые пептоны вместо пептонов животного происхождения, что позволяет исключить риск губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатии (BSE/TSE).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. Пептоны являются химически определёнными.

* Химически определённые пептоны.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда Tergitol-7 Agar первоначально разработана Чапманом и позднее модифицирована добавлением 2,3,5-трифенилтетразолий хлорида (TTC). Среда обладает селективными и дифференциальными свойствами и используется для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов.

Гептадецилсульфат натрия (Tergitol-7) обладает селективным бактерицидным действием, подавляет грамположительные бактерии и роение Proteus, обеспечивая лучшее восстановление колиформных микроорганизмов.

Назначение компонентов:

• пептоны HiCynth™ № 1 и HiCynth™ № 5 служат источниками углерода, азотсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью и других необходимых питательных веществ, включая витамины группы B;
• гептадецилсульфат натрия (Tergitol-7) ингибирует грамположительные бактерии и роение Proteus;
• бромтимоловый синий используется как индикатор pH;
• лактоза обеспечивает дифференциацию микроорганизмов по способности к ферментации;
• TTC восстанавливается бактериальной клеткой, за исключением Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, с образованием формазана — красного нерастворимого комплекса.

Интерпретация окраски колоний:

• лактозоферментирующие микроорганизмы образуют жёлтые колонии с жёлтыми зонами;
• Klebsiella и Enterobacter образуют зеленовато-жёлтые колонии;
• нелактозоферментирующие микроорганизмы образуют синие колонии;
• при восстановлении TTC формируются колонии красного цвета.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,12 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; давление — 15 lbs (примерно 0,10 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавьте 3 мл 1%-ного раствора трифенилтетразолий хлорида (TTC), FD057.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика анализа мембранной фильтрацией

1. Профильтруйте исследуемый образец через две мембраны.
2. Поместите одну мембрану на чашку с TTC Tergitol HiCynth™ Agar для определения общих колиформ.
3. Поместите вторую мембрану на отдельную чашку с TTC Tergitol HiCynth™ Agar для определения фекальных колиформ.
4. Инкубируйте первую чашку при 37 °C в течение 24 ч.
5. Инкубируйте вторую чашку при 44 °C в течение 18–24 ч.
6. Жёлтые колонии с интенсивно жёлтым ореолом после инкубации при 44 °C идентифицируйте как фекальные колиформные бактерии.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется зелёный опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 3,31%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации в течение 18–48 ч при 35–37 °C с добавлением 1%-ного раствора TTC (FD057).