HiMedia MCD493-500G HiCynth агар с желчью, эскулином и азидом

Селективная питательная среда HiMedia MCD493-500G HiCynth агар с желчью, эскулином и азидом для изоляции и предварительной идентификации фекальных стрептококков. Применяется для анализа проб пищевых продуктов и воды; содержит химически определенные пептоны HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на способности энтерококков и стрептококков группы D гидролизовать эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа, образуя коричнево-черный осадок.

В данной модификации (Bile Esculin Azide Agar) концентрация желчи снижена, а в состав введен азид натрия для подавления роста большинства сопутствующих бактерий. Пептоны HiCynth™ No.3 и No.5 служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и основных питательных веществ.

Интерпретация результатов:

• Положительная реакция: образование зоны черного осадка вокруг колоний. При использовании среды в виде скоса положительным считается почернение более половины скоса в течение 24–48 часов.
• Отрицательная реакция: полное отсутствие почернения или почернение менее половины скоса в течение 24–48 часов.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 56,65 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

1. Прямой посев: Инкубация образца при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.

2. Анализ проб воды (метод мембранной фильтрации):

• Пробы воды фильтруют через мембранные фильтры.
• Фильтры асептически помещают на среду Slanetz and Bartely (M612I).
• Красные или бордовые колонии, обнаруженные после инкубации, подтверждают путем асептического переноса мембранного фильтра на чашку с агаром Bile Esculin Azide, предварительно нагретым до 44 °C.
• Инкубируют при температуре 44 $\pm$ 0,5 °C в течение 2 часов.
• Все типичные колонии с коричнево-черным окрашиванием окружающей среды подсчитываются как кишечные энтерококки.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Происхождение компонентов: химически определенные (HiCynth™)
• Тип продукта: HiCynth™
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 500 г
• pH (диапазон): 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

Типы образцов:

• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

Ограничения:

• Стрептококки группы Viridians иногда дают слабую положительную реакцию.
• Виды Leuconostoc, Pediococcus, Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный тест на эскулин.
• Для окончательной идентификации энтерококков необходимо проведение дополнительных биохимических тестов (например, тест на солеустойчивость).

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком (в чашках Петри).
• Реакция: pH 7,1 $\pm$ 0,2 для 5,67% водного раствора при 25 °C.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.