HiMedia MCD467-500G HiCynth агар Хектоена энтерик

Питательная агаризованная среда HiMedia MCD467-500G HiCynth агар Хектоена энтерик производства HiMedia предназначена для дифференциального и селективного выделения видов Shigella и Salmonella из различных образцов. Среда применяется для анализа пищевых и молочных продуктов, при этом для полной идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

HiMedia MCD467-500G HiCynth агар Хектоена энтерик рекомендован для дифференциального и селективного выделения видов Shigella и Salmonella из различных образцов.

Тип образца

• Пищевые продукты
• Молочные продукты

Состав

Состав на 1 л среды:

* Пептоны с химически определённым составом.

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среды, выделяющие более широкий спектр кишечных патогенов, обычно оказывают меньшее ингибирующее действие на представителей непатогенной кишечной микрофлоры.

Агар Хектоена энтерик был разработан в 1967 году Кингом и Метцгером из Института Хектоена для повышения частоты выделения микроорганизмов Shigella и Salmonella по сравнению с их выделением на других средах, широко применявшихся в лабораториях в тот период.

HiCynth™ агар Хектоена энтерик представляет собой модификацию этой среды с использованием пептонов с химически определённым составом, не содержащих пептоны животного и растительного происхождения. Это позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерных для пептонов животного происхождения.

Дезоксихолат натрия заменён солями желчных кислот в пониженной концентрации. Такая рецептура обеспечивает рост Shigella и представителей рода Salmonella. Концентрация пептонов HiCynth™ увеличена для компенсации ингибирующего действия солей желчных кислот.

Повышенное содержание углеводов, пептона HiCynth™ № 2 и пептона HiCynth™ № 6 уменьшает ингибирующее действие солей желчных кислот и индикаторов и обеспечивает хороший рост видов Salmonella и Shigella при подавлении нормальной кишечной микрофлоры.

Среда содержит три углевода — лактозу, сахарозу и салицин — для дифференциации кишечных патогенов. Повышенная концентрация лактозы облегчает визуализацию кишечных патогенов и уменьшает вероятность поздней ферментации лактозы. Салицин ферментируется многими колиформными бактериями, включая микроорганизмы, не ферментирующие лактозу и сахарозу.

Сочетание цитрата аммония железа и тиосульфата натрия позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S), что помогает дифференцировать микроорганизмы по формированию колоний с чёрным центром.

Индикаторная система, состоящая из кислотного фуксина и бромтимолового синего, обладает более низкой токсичностью по сравнению с другими средами для кишечных микроорганизмов и способствует восстановлению кишечных патогенов.

Для повышения селективности среды может использоваться новобиоцин в концентрации 15 мг/л; новобиоцин подавляет виды Citrobacter и Proteus. Среда также применяется для дифференциации патогенных кишечных микроорганизмов и улучшения роста представителей рода Shigella.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 76,67 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика посева и инкубации

1. Для посева используйте свежие фекалии, суспендированные в растворе Рингера, либо непосредственно ректальные тампоны.
2. Распределите посевной материал по поверхности среды таким образом, чтобы получить изолированные колонии.
3. Инкубируйте чашки при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
4. Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию Salmonella и Shigella.
5. Для подтверждения вида проведите дальнейшее исследование, поскольку виды Proteus могут иметь сходный с Salmonella или Shigella вид.

После инкубации на большинстве чашек формируется зона сплошного роста. Метод штрихового посева фактически является методом «разведения»: по мере нанесения штрихов на последующие участки поверхности среды количество оседающих микроорганизмов уменьшается. Поэтому один или несколько участков должны содержать изолированные колонии микроорганизмов, присутствующих в образце. Ингибирующее действие среды способствует лучшему выделению отдельных колоний.

Требования к образцам и обращению

Для пищевых и молочных образцов применяйте подходящие методы отбора и подготовки проб в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию Salmonella и Shigella. Виды Proteus могут иметь сходный с Salmonella или Shigella вид, поэтому для подтверждения требуются дополнительные тесты.
2. Поскольку среда является селективной, её необходимо использовать совместно с другими питательными средами.
3. Для полной идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические исследования.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные для микробиологических лабораторий.
• Требования безопасности следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Порошок от кремового до жёлтого цвета, однородный, свободно пересыпающийся, с желтовато-коричневым оттенком.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель зелёного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 7,67 % при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: MCD467-500G
• Тип продукта: HiCynth™
• Назначение изделия: агар
• Происхождение пептонов: химически определённый состав, HiCynth™
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30