HiMedia MCD393-500G Основа декарбоксилазного HiCynth бульона Мёллера

Основа декарбоксилазного HiCynth бульона Мёллера HiMedia MCD393-500G для дифференциации бактерий по их способности декарбоксилировать аминокислоты. Применяется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды при добавлении соответствующих L-аминокислот.

Принцип измерения

Основа Decarboxylase HiCynth™ Broth Base, Moeller используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основе их способности декарбоксилировать аминокислоты. В среде используется химически определенный пептон HiCynth™ No.1, который обеспечивает азотистые и углеродистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества.

Декстроз служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль является кофактором фермента декарбоксилазы. В качестве индикаторов pH используются бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный.

Процесс интерпретации:

1. При инокуляции бактериями, ферментирующими декстрозу, pH снижается из-за образования кислоты, и цвет индикатора меняется с пурпурного на жёлтый.
2. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазу.
3. Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина, орнитина — к путресцину. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.
4. Образование этих аминов повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из жёлтого в пурпурный.
5. Если организмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остаётся кислой (жёлтого цвета).

Для достоверности теста каждый изолят должен быть также инокулирован в контрольную пробирку с основой бульона Мёллера, не содержащую аминокислот.

Методика приготовления и анализа

1. Суспендируйте 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или других L-аминокислот. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
3. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
4. При добавлении L-орнитина требуется повторная корректировка pH.
5. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
6. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 10 минут.
7. После инокуляции пробирки необходимо защитить от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности, что сделает тест недостоверным.

Технические характеристики

Свойства готовой среды

• Внешний вид порошка: однородный свободный порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность раствора: пурпурный, прозрачный раствор без осадка.
• pH (при 25 °C): 5,80–6,20 (номинал 6,0 $\pm$ 0,2).

Состав, г/л

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и созданием слоя стерильного минерального масла.

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды.

Ограничения:

• Некоторые требовательные организмы могут демонстрировать замедленную реакцию.
• Для получения корректных результатов обязательно использование слоя минерального масла.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны роста на данной среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности. Использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами.