HiMedia MCD393-500G Основа декарбоксилазного HiCynth бульона Мёллера

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia MCD393-500G Основа декарбоксилазного HiCynth бульона Мёллера производства HiMedia имеет химически определённый состав HiCynth™ и предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Основа используется в микробиологическом анализе пищевых, молочных и водных проб; для проведения реакции требуется добавление соответствующей L-аминокислоты и перекрытие среды стерильным минеральным маслом.

Назначение

Основа декарбоксилазного HiCynth™ бульона Мёллера предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты при добавлении соответствующей L-аминокислоты. Среда применяется для дифференциации грамотрицательных кишечных бацилл.

Состав

Состав на 1 л среды:

* Пептон с химически определённым составом.
** Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия эксплуатационным параметрам.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
3. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При необходимости нагревайте смесь до полного растворения среды.
5. При добавлении L-орнитина повторно отрегулируйте значение pH.
6. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.

Принцип действия и интерпретация

Декарбоксилазный HiCynth™ бульон Мёллера используется для дифференциации грамотрицательных кишечных бацилл по способности декарбоксилировать аминокислоты. Метод декарбоксилазного бульона для выявления продукции лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдигидролазы был введён Мёллером. До исследований Мёллера бактериальные декарбоксилазы аминокислот изучались Gale и Gale совместно с Epps.

Продукция орнитиндекарбоксилазы может использоваться для дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter. Бактерии рода Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как бактерии рода Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Декарбоксилазный HiCynth™ бульон Мёллера приготовлен с заменой пептонов животного и растительного происхождения на пептоны с химически определённым составом для исключения рисков, связанных с BSE/TSE и пептонами животного происхождения.

• Пептон HiCynth™ № 1 обеспечивает азотсодержащие и углеродсодержащие соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые для роста бактерий питательные вещества.
• Декстроза является ферментируемым углеводом.
• Пиридоксаль служит кофактором фермента декарбоксилазы.
• Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный являются индикаторами pH среды.
• При посеве бактерий, ферментирующих декстрозу, pH снижается вследствие образования кислот, а цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый.
• Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазу.
• При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин.
• При декарбоксилировании орнитина образуется путресцин.
• Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.
• Образование аминов повышает pH среды, вследствие чего цвет индикатора изменяется с жёлтого на пурпурный.
• Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и приобретает жёлтую окраску.

Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку со средой декарбоксилазного бульона Мёллера без добавления аминокислоты. Засеянные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать ощелачивание поверхности среды и сделать результат теста недействительным.

Пробы

Тип исследуемого материала

• Пищевые и молочные пробы.
• Водные пробы.

Отбор и обращение с пробами

Для пищевых и молочных проб применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам. Для водных проб применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте маркировку. При работе с пробами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы и стандартные меры предосторожности, установленные для обращения с пробами. Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Некоторые требовательные к условиям культивирования микроорганизмы могут давать замедленную реакцию.
2. Перекрытие среды минеральным маслом необходимо для получения корректных результатов.
3. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель / артикул: MCD393-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiCynth™
• Происхождение пептона: химически определённый состав, HiCynth™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 500 г
• Температура хранения основы: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,80–6,20
• Условия контроля реакции: водный раствор концентрацией 1,05 % масс./об. при 25 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка в пробирках.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и перекрытием стерильным минеральным маслом.