HiMedia MCD393-100G Основа декарбоксилазного HiCynth бульона Мёллера

Основа декарбоксилазного HiCynth бульона Мёллера HiMedia MCD393-100G представляет собой химически определенную сухую среду для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Применяется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды; требует добавления соответствующих L-аминокислот для проведения анализа.

Принцип измерения

Среда используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основе их способности декарбоксилировать аминокислоты. В основе метода лежит обнаружение продукции лизин- и орнитин-декарбоксилазы, а также аргинин-дигидролазы.

В составе среды HiCynth™ Пептон №1 обеспечивает азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие важные питательные вещества. Декстроз выступает в роли ферментируемого углевода, а пиридоксаль является кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный служат pH-индикаторами.

При инокуляции бактериями, ферментирующими декстроз, pH снижается из-за образования кислоты, и цвет индикатора меняется с пурпурного на желтый. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазы. Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина, а орнитина — путресцина. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина. Образование этих аминов повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из желтого в пурпурный. Если организмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остается кислой (желтой).

Методика проведения анализа

1. Растворите 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или других L-аминокислот. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
3. При необходимости прогрейте среду для полного растворения компонентов.
4. При добавлении L-орнитина требуется повторная корректировка pH.
5. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
6. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 10 минут.
7. Внесите исследуемый изолят в пробирку с основой среды (без аминокислоты) в качестве контроля.
8. Внесите изолят в пробирку с основой среды и соответствующей аминокислотой.
9. Обязательно защитите поверхность среды от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности, что сделает тест недостоверным.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и созданием слоя стерильного минерального масла.

Контроль качества

• Внешний вид: светло-желтый или зеленовато-желтый гомогенный свободно текущий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный раствор без осадка в пробирках.
• Реакция: pH 1,05% (масс./об.) водного раствора при 25 °C составляет 6,0 $\pm$ 0,2.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения применения

1. Некоторые привередливые организмы могут демонстрировать замедленную реакцию.
2. Наличие слоя минерального масла обязательно для получения достоверных результатов.
3. Индивидуальные требования организмов к росту могут варьироваться, что приводит к различным паттернам роста на среде.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты инсинерации.