HiMedia MCD298-500G HiCynth агар МакКонки с сорбитолом

Питательная агаровая среда HiMedia MCD298-500G HiCynth агар МакКонки с сорбитолом — порошкообразный продукт массой 500 г с конечным значением pH 7,1 ± 0,2. Среда предназначена для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, связанных с диареей у детей грудного возраста, но не должна использоваться как единственный метод выявления патогенных штаммов E. coli O157:H7.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, связанных с диареей у детей грудного возраста.

Состав

Состав на 1 л среды:

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

* Химически определённые пептоны.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар МакКонки с сорбитолом HiCynth™ разработан на основе состава, описанного Rappaport и Henigh.

Среда предназначена для выделения энтеропатогенной Escherichia coli O157:H7, которая ферментирует лактозу, но не ферментирует сорбитол и поэтому образует бесцветные колонии. Животные пептоны полностью заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота, трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями и генетически модифицированными компонентами.

Escherichia coli O157:H7 признана причиной геморрагического колита. Патогенность E. coli O157:H7 для человека связана с геморрагическим колитом, возникающим вследствие действия шигоподобного токсина.

На стандартном агаре МакКонки с лактозой этот штамм неотличим от других лактозоферментирующих штаммов E. coli. В агаре МакКонки с сорбитолом лактоза заменена сорбитолом. В отличие от большинства штаммов E. coli, E. coli O157:H7 ферментирует сорбитол медленно либо не ферментирует его вообще.

При росте E. coli O157:H7 на агаре МакКонки с сорбитолом образуются бесцветные колонии, тогда как большинство представителей фекальной микрофлоры ферментируют сорбитол и формируют розовые колонии. Поэтому агар МакКонки с сорбитолом позволяет визуально распознавать E. coli O157:H7.

Функции компонентов среды:

• Пептон HiCynth™ № 3 обеспечивает микроорганизмы необходимыми азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, минералами, витаминами и микроэлементами, необходимыми для роста.
• Кристаллический фиолетовый и синтетическое моющее средство № 1 подавляют рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Нейтральный красный служит индикатором.
• D-сорбитол является ферментируемым углеводом.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 50,03 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 psi (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Пищевые образцы.
• Образцы молочной продукции.
• Клинические образцы: фекалии.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов и образцов молочной продукции применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Агар МакКонки с сорбитолом HiCynth™ не следует использовать как единственный метод выявления патогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, поскольку некоторые нетоксигенные штаммы также не ферментируют сорбитол.
2. Для дополнительного подтверждения необходимо провести дальнейшие биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,0 % при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабоч