HiMedia MCD298-100G HiCynth агар МакКонки с сорбитолом

Агаровая питательная среда HiMedia MCD298-100G HiCynth агар МакКонки с сорбитолом производства HiMedia в порошковой форме предназначена для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, связанных с диареей у детей грудного возраста. Среда применяется для пищевых, молочных и клинических образцов кала, при этом для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, включая Escherichia coli O157:H7, из следующих типов образцов:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• клинические образцы — кал.

Состав

Состав среды, г/л:

* Пептоны с химически определённым составом.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

HiCynth агар МакКонки с сорбитолом основан на рецептуре, описанной Rappaport и Henigh. Среда предназначена для выделения энтеропатогенной Escherichia coli O157:H7, которая ферментирует лактозу, но не ферментирует сорбитол, вследствие чего образует бесцветные колонии.

В стандартном агаре МакКонки, содержащем лактозу, этот штамм невозможно отличить от других лактозоферментирующих штаммов Escherichia coli. В агаре МакКонки с сорбитолом лактоза заменена сорбитолом. В отличие от большинства штаммов Escherichia coli, Escherichia coli O157:H7 ферментирует сорбитол медленно или не ферментирует его вообще.

Рост Escherichia coli O157:H7 на агаре МакКонки с сорбитолом сопровождается образованием бесцветных колоний, тогда как большинство представителей фекальной микрофлоры ферментируют сорбитол и формируют розовые колонии. Благодаря этому агар МакКонки с сорбитолом позволяет выявлять Escherichia coli O157:H7 по окраске колоний.

В среде животные пептоны полностью заменены пептонами с химически определённым составом, что исключает риски, связанные с пептонами животного происхождения: губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE), трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE) и генетически модифицированными организмами (GMO).

Escherichia coli O157:H7 является патогенным для человека микроорганизмом, связанным с геморрагическим колитом, который возникает вследствие действия шигоподобного токсина (SLT). Этот микроорганизм признан одной из причин геморрагического колита.

Функции компонентов

• Пептон HiCynth™ № 3: источник азотистых и углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, минеральных веществ, витаминов и микроэлементов, необходимых для роста микроорганизмов.
• Кристаллический фиолетовый и синтетическое моющее средство № 1: подавляют рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотическое равновесие.
• Нейтральный красный: индикатор.
• D-сорбитол: ферментируемый углевод.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 50,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция 5,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. HiCynth агар МакКонки с сорбитолом не следует использовать как единственный метод выявления патогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, поскольку некоторые нетоксигенные штаммы также не ферментируют сорбитол.
2. Для окончательного подтверждения необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Требования к рабочим характеристикам

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами:

• используйте защитные перчатки;
• носите защитную одежду;
• применяйте средства защиты глаз;
• применяйте средства защиты лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами;
• при необходимости обращайтесь к указаниям по безопасности в индивидуальных паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.