HiMedia MCD248-500G Основа KF стрептококкового HiCynth агара

Питательная среда HiMedia MCD248-500G Основа KF стрептококкового HiCynth агара — сухая химически определённая основа с конечным pH 7,2 ± 0,2. Основа предназначена для селективного выделения и количественного определения фекальных стрептококков в поверхностной воде методом прямого посева или мембранной фильтрации; среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Основа KF стрептококкового HiCynth агара применяется для селективного выделения и количественного определения фекальных стрептококков в поверхностной воде методом прямого посева или мембранной фильтрации.

Состав

Концентрация компонентов указана в г/л.

* Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.
* Пептоны имеют химически определённый состав.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 76,4 г сухой основы в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона бромкрезолового пурпурного FD093.
3. Нагрейте среду до кипения для полного растворения.
4. Не автоклавируйте среду. Перегрев снижает pH и ухудшает продуктивность среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте в стерильную среду 10 мл 1%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолийхлорида (ТТХ, TTC) FD057.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стрептококки представляют собой сферические грамположительные бактерии, входящие в состав нормальной комменсальной микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Стрептококки, обнаруживаемые в фекалиях, относятся к фекальным стрептококкам и включают стрептококки с антигенами группы D по Лансфилду. К этой группе относятся Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, Streptococcus bovis и Streptococcus duran.

Фекальные стрептококки являются патогенами низкой степени вирулентности и редко вызывают заболевания. Возможные случаи заболевания включают инфекции мочевыводящих путей у пациентов с катетерами, смешанные инфекции брюшных ран после операций на кишечнике и эндокардит на патологически изменённых клапанах.

Среда Кеннера—Фекаля (KF) разработана для обнаружения стрептококков в воде и пищевых продуктах. Основа агара KF для стрептококков рекомендована APHA для количественного определения фекальных стрептококков в пищевых продуктах. В основе KF-агара для стрептококков HiCynth животные пептоны заменены химически определёнными пептонами, что исключает риск губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатии (BSE/TSE).

Пептоны HiCynth № 3 и HiCynth № 6 обеспечивают фекальные стрептококки источниками азота, углеродсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и следовых компонентов. Лактоза и мальтоза являются ферментируемыми углеводами и служат источниками энергии. Азид натрия действует как селективный агент, подавляющий рост грамотрицательных бактерий.

2,3,5-Трифенилтетразолийхлорид восстанавливается активно метаболизирующими клетками до нерастворимого формазана, в результате чего образуются розовые или красные колонии. Бактерии, устойчивые к азиду, используют лактозу и/или мальтозу. Образующаяся кислота изменяет цвет индикаторных красителей на жёлтый. Восстановление ТТХ бактериальными клетками до нерастворимого формазана приводит к образованию колоний от розового до красного цвета.

Методика посева и инкубации

Пробы можно непосредственно штриховать по поверхности среды. При использовании мембранно-фильтрационного метода стерильные мембранные фильтры, через которые пропущены пробы воды, асептически помещают на поверхность среды.

После инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч энтерококки образуют колонии от розового до красного цвета. Полученная идентификация является предположительной; после неё необходимо выполнить дополнительные подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базальная среда: светло-жёлтая.
• До добавления FD093 (бромкрезолового пурпурного): в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета.

Реакция

Реакция 7,64%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления FD057 и FD093 и инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Масса: 500 г.
• Температура: 10–30 °C.
• Конечный pH: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Хранение и срок годности

• Храните сухую основу при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Дополнительные компоненты

Для приготовления готовой среды необходимы:

• бромкрезоловый пурпурный FD093 — регидратированное содержимое одного флакона;
• 1%-ный раствор 2,3,5-трифенилтетразолийхлорида (ТТХ, TTC) FD057 — 10 мл на приготовленную среду.

Техническое отличие состава

В основе KF-агара HiCynth животные пептоны заменены химически определёнными пептонами HiCynth № 3 и HiCynth № 6.