Основа питательной среды HiMedia MCD1640-500G Основа HiCynth агара для Burkholderia cepacia представляет собой химически определённый порошковый компонент для приготовления селективной среды. Применяется для выделения Burkholderia cepacia из респираторного секрета пациентов с муковисцидозом и других образцов, при этом результаты посева не должны быть единственным критерием идентификации микроорганизма.

Назначение

Среда рекомендована для выделения Burkholderia cepacia из респираторного секрета пациентов с муковисцидозом и других образцов неклинического происхождения.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: химически определённая основа HiCynth™
• Масса: 500 г
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Условия хранения: 10–30 °C

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

— химически определённые пептоны.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 18,26 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки PGT (FD232).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Burkholderia cepacia является важным условно-патогенным микроорганизмом и вызывает лёгочные инфекции у пациентов с муковисцидозом (CF). Микроорганизм может приводить к развитию синдрома Burkholderia cepacia — некротизирующей пневмонии, сопровождающейся лихорадкой и способной быстро привести к летальному ухудшению клинического состояния.

B. cepacia сложно выделить на обычно используемой в лабораториях среде МакКонки, поскольку микроорганизм растёт медленно и обычно вытесняется более быстро растущими Escherichia coli, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa.

Основа агара для Burkholderia cepacia разработана на основе среды PC, первоначально предложенной Gilligan. Среда продемонстрировала более высокую пригодность для роста B. cepacia по сравнению с агаром МакКонки. В основе агара HiCynth для Burkholderia cepacia пептоны животного происхождения полностью заменены химически определёнными пептонами, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Селективность среды для B. cepacia обеспечивается добавлением синтетического моющего средства № 1, кристаллического фиолетового и антибиотиков, входящих в состав добавки FD232.

• Пептоны HiCynth™ № 1 и № 5 обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, источник витаминов группы B и другие необходимые питательные вещества.
• Кристаллический фиолетовый, синтетическое моющее средство № 1 и противомикробные компоненты выполняют функцию селективных агентов.
• Кристаллический фиолетовый и синтетическое моющее средство № 1 подавляют рост грамположительных кокков, включая энтерококки и стафилококки.
• Антибиотики, входящие в состав добавки FD232, — тикарциллин, полимиксин B и гентамицин — подавляют рост грамотрицательных бактерий.
• B. cepacia метаболизирует пируват с образованием щелочных продуктов. Эти продукты повышают pH среды.
• Индикатор феноловый красный изменяет цвет с розово-оранжевого на розово-красный при щелочном pH.

Посев проводят на чашку с образцом таким образом, чтобы получить изолированные колонии. Для роста B. cepacia, формирования колоний и последующего изменения цвета среды чашки инкубируют в течение 4 суток.

Среда не является селективной исключительно для B. cepacia. На ней могут расти другие микроорганизмы, формирующие сходные колонии. Поэтому результаты, полученные на этой среде, не должны использоваться как единственный критерий идентификации B. cepacia.

Образцы и обращение с ними

• Тип образца: клинические образцы — респираторный секрет.
• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Из-за различий в пищевых потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для полной идентификации необходимы дополнительные серологические и биохимические исследования.
3. Другие микроорганизмы могут формировать на среде колонии, сходные с колониями B. cepacia.
4. Результат культивирования на этой среде не должен быть единственным основанием для идентификации B. cepacia.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция: реакция 3,65 % масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 6,2 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,00–6,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после добавления селективной добавки PGT (FD232) и инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.